Sự khác biệt chính giữa ly tâm siêu ly tâm đệm sucrose và sucrose là trong ly tâm siêu ly tâm gradient sucrose, một gradient sucrose liên tục được sử dụng, trong khi trong ly tâm siêu ly tâm đệm sucrose, một gradient sucrose không liên tục được sử dụng.
Sucrose gradient và siêu ly tâm đệm sucrose là hai loại kỹ thuật tương tự được sử dụng để tách các loại đại phân tử cụ thể. Trong cả hai kỹ thuật, một gradient mật độ đường sucrose được sử dụng. Nhưng trong ly tâm siêu ly tâm gradient sacaroza, một gradien mật độ liên tục được sử dụng trong khi, trong ly tâm siêu ly tâm đệm sacaroza, một gradien mật độ không liên tục được sử dụng.
Sucrose Gradient Ultracentation là gì?
Sucrose siêu ly tâm siêu ly tâm là một kỹ thuật có thể được sử dụng để phân tách các đại phân tử như DNA, RNA và protein. Có một số bước trong kỹ thuật này. Chúng là sự chuẩn bị gradient sucrose, ly tâm, tách và rửa giải. Chuẩn bị gradient là bước quan trọng trong kỹ thuật này. Trong kỹ thuật này, mẫu chứa các đại phân tử có kích thước khác nhau được xếp lớp trên bề mặt của cột gradient sucrose. Khi ly tâm, các đại phân tử có kích thước khác nhau sẽ lắng qua cột gradien đường sucrose với tốc độ khác nhau. Sự lắng cặn phụ thuộc vào một số yếu tố, bao gồm lực ly tâm, hình dạng kích thước và mật độ của các đại phân tử, mật độ và độ nhớt của gradient. Vào cuối quá trình ly tâm, các đại phân tử được phân tách về mặt không gian theo mật độ. Các đại phân tử lớn hơn (đại phân tử mật độ cao) trầm tích về phía đáy. Những cái nhẹ hơn (đại phân tử mật độ thấp) vẫn ở trên cùng của gradient. Do đó, các phân tử tách ra thành các dải khác nhau. Sau đó, các dải sẽ được tách ra và quá trình tinh chế đại phân tử cụ thể khỏi sucrose phải được thực hiện.
Hình 01: Máy ly tâm siêu ly tâm Sucrose Gradient
Về mặt ứng dụng, phương pháp này được sử dụng rộng rãi để phân đoạn các phân tử DNA. Quá trình siêu ly tâm gradient của sucrose thường được sử dụng để xác định kích thước và thành phần phức tạp của protein. Hơn nữa, kỹ thuật này được sử dụng để tinh chế một phần mRNA.
Sucrose Cushion Ultracent Lyation là gì?
Sucrose đệm siêu ly tâm là một kỹ thuật khác cho phép phân đoạn các đại phân tử. Không giống như siêu ly tâm gradient mật độ sacaroza, ly tâm siêu ly tâm đệm sacaroza sử dụng một gradien mật độ không liên tục. Nồng độ sacaroza tăng từ trên xuống dưới theo các bước rời rạc. Trong kỹ thuật này, sự phân tách đạt được bằng cách đặt phần chiết đã làm rõ lên trên một thể tích nhỏ của dung dịch sacaroza trong ống ly tâm, cái gọi là đệm sacaroza. Điều này cho phép tách tốt hơn trong ly tâm tốc độ cao. Khi các phân tử tách ra như một dải giữa đệm sacaroza, dải màu trắng có thể được thu thập và tinh chế. Hơn nữa, các tạp chất có thể được loại bỏ thêm bằng cách sử dụng phương pháp đệm sucrose. Phương pháp đệm sacaroza cho phép chứa 60-70% ống chứa mẫu. Do đó, phương pháp đệm sacaroza cho phép xử lý khối lượng mẫu lớn hơn.
Điểm giống nhau giữa Sucrose Gradient và Sucrose Cushion Ultracentation là gì?
- Sucrose gradient và siêu ly tâm đệm sucrose là hai kỹ thuật được sử dụng để tách hỗn hợp các đại phân tử.
- Trong cả hai phương pháp, gradient sucrose đều được sử dụng.
- Ly tâm là một bước trong cả hai phương pháp.
- Các phân tử lắng đọng thành một dải hoặc vùng trong mỗi phương pháp.
Sự khác biệt giữa Sucrose Gradient và Sucrose Cushion Ultracentation là gì?
Ly tâm siêu ly tâm gradient sucrose là kỹ thuật sử dụng gradient sucrose liên tục trong ống ly tâm trong khi ly tâm siêu ly tâm đệm sucrose là kỹ thuật sử dụng gradient sucrose không liên tục. Vì vậy, đây là sự khác biệt chính giữa gradient sucrose và siêu ly tâm đệm sucrose.
Hơn nữa, ly tâm siêu ly tâm đệm sucrose cho phép xử lý khối lượng mẫu lớn hơn trong khi siêu ly tâm gradient sacaroza cho phép xử lý một lượng mẫu tương đối thấp.
Bảng đồ họa thông tin dưới đây trình bày thêm sự khác biệt giữa gradient sucrose và siêu ly tâm đệm sucrose.
Tóm tắt - Sucrose Gradient vs Sucrose Cushion Ultracentation
Quá trình siêu ly tâm gradient sucrose tách các đại phân tử bằng cách sử dụng gradient sucrose liên tục. Ngược lại, ly tâm siêu ly tâm đệm sacaroza sử dụng gradien sacaroza không liên tục để tách loại hạt cụ thể trong hỗn hợp. Vì vậy, đây là sự khác biệt chính giữa gradient sucrose và siêu ly tâm đệm sucrose. Phương pháp đệm sacaroza cho phép thu thập các hạt nguyên vẹn về hình thái vì nó không gây ra ứng suất cơ học, không giống như phương pháp siêu ly tâm gradient sacaroza, phương pháp này sẽ nghiền nát các phân tử xuống đáy ống. Hơn nữa, ly tâm siêu ly tâm đệm sacaroza cho phép xử lý một lượng mẫu lớn hơn so với ly tâm siêu ly tâm gradient sacaroza.
