Sự khác biệt chính giữa rửa giải đẳng cấp và rửa giải gradient là rửa giải đẳng cấp đề cập đến việc duy trì nồng độ không đổi trong pha động, trong khi rửa giải gradient đề cập đến việc duy trì nồng độ thay đổi trong pha động.
Các thuật ngữ rửa giải đẳng cấp và rửa giải gradient được sử dụng trong sắc ký. Trong quá trình chạy sắc ký, chúng tôi sử dụng pha tĩnh, là chất không chuyển động, cùng với pha động là chất chuyển động. Sự rửa giải đẳng cấp và gradient mô tả các đặc tính của pha động.
Isocratic Elution là gì?
Rửa giải đẳng cấp là một thuật ngữ được sử dụng trong sắc ký khi pha động có nồng độ không đổi. Ở đây, nồng độ của pha động là không đổi trong suốt quá trình sắc ký. Trong quá trình này, chúng ta có thể quan sát thấy chiều rộng pic tăng lên theo thời gian lưu một cách tuyến tính trên sắc ký đồ. Tuy nhiên, điều này dẫn đến một nhược điểm - các đỉnh rửa giải muộn đối với rửa giải muộn rất bằng phẳng và rộng. Do đó, những đỉnh rộng này trở nên khó được công nhận là đỉnh.
Hơn nữa, trong rửa giải đẳng cấp, độ chọn lọc không thay đổi theo kích thước cột. Điều này có nghĩa là độ chọn lọc không phụ thuộc vào những thay đổi trong kích thước cột. Ở đây, chiều dài và đường kính được coi là kích thước của cột. Do đó, các đỉnh rửa giải theo cùng một thứ tự.
Gradient Elution là gì?
Rửa giải gradient là một thuật ngữ được sử dụng trong sắc ký khi ở đây pha động có nồng độ thay đổi. Nói cách khác, nồng độ của pha động không nhất thiết phải không đổi. Ví dụ, trong HPLC, một phương pháp tách phổ biến sử dụng metanol 10% ban đầu và kết thúc ở 90%, bằng cách tăng dần nồng độ. Pha động có hai thành phần: dung môi yếu và dung môi mạnh. Dung môi yếu cho phép chất tan rửa giải chậm trong khi dung môi mạnh làm cho chất tan rửa giải nhanh chóng. Trong sắc ký pha ngược, chúng tôi sử dụng nước làm dung môi yếu và dung môi hữu cơ làm dung môi mạnh.
Hình 01: HPLC
Hơn nữa, phương pháp rửa giải gradient làm giảm các thành phần rửa giải sau đó để làm cho chúng rửa giải nhanh hơn, tạo ra một pic hẹp trên sắc ký đồ. Phương pháp này cũng cải thiện hình dạng đỉnh và chiều cao đỉnh. Hơn nữa, trong kỹ thuật rửa giải gradient, thứ tự rửa giải thay đổi cùng với những thay đổi về kích thước cột.
Sự khác biệt giữa Isocratic và Gradient Elution là gì?
Các thuật ngữ rửa giải đẳng cấp và rửa giải gradient được sử dụng trong sắc ký. Rửa giải đẳng cấp và gradient mô tả các đặc tính của pha động. Sự khác biệt chính giữa rửa giải đẳng cấp và rửa giải gradient là rửa giải đẳng cấp đề cập đến việc duy trì nồng độ không đổi trong pha động trong khi rửa giải gradient đề cập đến việc duy trì nồng độ thay đổi trong pha động.
Trong kỹ thuật rửa giải đẳng cấp, chiều rộng pic tăng theo tuyến tính thời gian lưu. Tuy nhiên, trong kỹ thuật rửa giải gradient, việc giữ lại các thành phần rửa giải sau bị giảm, do đó quá trình rửa giải trở nên nhanh hơn và tạo ra các pic hẹp. Ngoài ra, trong rửa giải đẳng cấp, độ chọn lọc không phụ thuộc vào kích thước cột, nhưng trong rửa giải theo độ dốc, độ chọn lọc thay đổi khi kích thước cột thay đổi.
Bảng sau đây tóm tắt sự khác biệt giữa rửa giải đẳng cấp và rửa giải gradient.
Tóm tắt - Isocratic vs Gradient Elution
Rửa giải đẳng cấp và rửa giải gradient mô tả các đặc tính của pha động. Sự khác biệt chính giữa rửa giải đẳng cấp và rửa giải gradient là rửa giải đẳng cấp đề cập đến việc duy trì nồng độ không đổi trong pha động trong khi rửa giải gradient đề cập đến việc duy trì nồng độ thay đổi trong pha động.
