Sự khác biệt chính - CFU và MPN
Đơn vị hình thành khuẩn lạc (CFU) và Số lượng có thể xảy ra nhiều nhất (MPN) là hai phương pháp được sử dụng để thống kê vi sinh vật trong mẫu. Cả hai thông số này đều được sử dụng để phát hiện chất lượng nước và vi khuẩn chỉ thị phân trong mẫu nước. Đơn vị hình thành khuẩn lạc là một thước đo được sử dụng để thống kê số lượng tế bào vi khuẩn hoặc tế bào nấm còn sống trong thể tích hoặc trọng lượng cụ thể của một mẫu nhất định. Đơn vị tiêu chuẩn cho thông số này là CFU / ml hoặc CFU / g. Hầu hết số có thể xảy ra là một đơn vị khác được sử dụng để đo số lượng tế bào vi khuẩn sống sót trong một mẫu chất lỏng. Sự khác biệt chính giữa CFU và MPN là CFU được tính từ các khuẩn lạc vi khuẩn và nấm phát triển trên đĩa thạch đặc trong khi MPN được tính từ các vi khuẩn sống được phát triển trong môi trường lỏng.
CFU là gì?
Đơn vị hình thành khuẩn lạc (CFU) là một thông số đo lường số lượng tế bào vi khuẩn hoặc nấm còn sống trong một mẫu nhất định. Phương pháp đếm các đơn vị hình thành khuẩn lạc được gọi là đếm đĩa tiêu chuẩn. Các khuẩn lạc sống động xuất hiện trên đĩa thạch được biểu thị bằng CFU trên 1 ml (đơn vị tạo khuẩn lạc trên mililit) mẫu đối với chất lỏng hoặc CFU trên 1 g (đơn vị tạo khuẩn lạc trên một gam) mẫu đối với chất rắn.
Có hai phương pháp phổ biến được sử dụng để đo CFU trong một mẫu. Đó là phương pháp tấm trải và phương pháp tấm đổ. Hai phương pháp này được hỗ trợ bởi một kỹ thuật gọi là pha loãng nối tiếp. Các mẫu được pha loãng lần lượt cho phép thu được số lượng khuẩn lạc đếm được trên bề mặt thạch. Có thể trải một lượng mẫu đã biết lên bề mặt đĩa thạch, hoặc trộn với thạch và đổ lên đĩa. Sau đó, đĩa được ủ và đếm các khuẩn lạc phát sinh. Số lượng khuẩn lạc liên quan đến số lượng vi sinh vật trong mẫu ban đầu. Các đĩa có quá nhiều khuẩn lạc hoặc quá ít khuẩn lạc bị loại ra khỏi việc đếm vì kết quả có thể không chính xác về mặt thống kê trên các đĩa đó. Theo thống kê, phạm vi tốt nhất là 30 - 300 khuẩn lạc trên đĩa thạch. Do đó, các tấm chính xác nên được chọn để thống kê chính xác. Pha loãng nối tiếp được thực hiện cho chức năng trên.
Sau khi bạn đếm số lượng khuẩn lạc có thể sống được trên đĩa, CFU / ml có thể được tính theo công thức sau.
CFU trên mỗi ml mẫu ban đầu=số khuẩn lạc trên đĩa X Hệ số pha loãng
Hệ số pha loãng=(1 / Độ pha loãng của đĩa)
Ví dụ: nếu bạn nhận được 149 khuẩn lạc trên đĩa của độ pha loãng 10-4, thì số lượng vi khuẩn trong 1 ml mẫu ban đầu có thể được tính như sau:
CFU / ml=(149) x (1/10-4)
=149 × 104hoặc 1490000
=1. 49 x 106
Hình 01: Đơn vị hình thành khuẩn lạc
MPN là gì?
Con số có thể xảy ra nhất là một thước đo thay thế cho CFU / ml. MPN cũng ước tính các tế bào sống sót trong một mẫu chất lỏng. Nó đếm các sinh vật phát triển trong môi trường nuôi cấy lỏng và là một kỹ thuật chủ yếu là vi khuẩn học. Phương pháp này đặc biệt hữu ích đối với các mẫu chứa nồng độ tế bào vi khuẩn thấp; ví dụ, sữa, nước uống được, v.v. Giá trị MPN được biểu thị cho 100 ml thể tích. MPN dựa trên một phương pháp thống kê dựa trên lý thuyết xác suất. Có các bảng thống kê được thiết kế để tìm giá trị MPN trên 100 ml mẫu. Các bảng này hiển thị kết quả ở giới hạn tin cậy 95%.
Giá trịMPN được tính sau khi thực hiện một kỹ thuật được gọi là phương pháp lên men nhiều ống. Ba bộ ống chứa môi trường nuôi cấy thích hợp được cấy với ba thể tích khác nhau của mẫu như 10 ml, 1 ml và 0.1 ml và ủ cho sự phát triển. Sau thời gian ủ bệnh, các ống được cho điểm + (dương tính) hoặc - (âm tính) để biết có hoặc không có sự phát triển. Mẫu kết quả dương tính và âm tính sau đó được so sánh với bảng xác suất thống kê MPN để ước tính số lượng vi sinh vật. Sau đó, giá trị MPN được đưa ra cho 100 ml mẫu. MPN được sử dụng rộng rãi để phát hiện vi khuẩn coliform có trong mẫu nước.
Hình 02: Bảng MPN
Sự khác biệt giữa CFU và MPN là gì?
CFU vs MPN |
|
CFU là thước đo được sử dụng để biểu thị số lượng khuẩn lạc vi khuẩn hoặc nấm còn sống trong một mẫu nhất định. | MPN là một thước đo thay thế cho CFU và đo số lượng tế bào vi khuẩn sống sót trong một mẫu chất lỏng. |
Đơn vị | |
CFU / ml hoặc CFU / g | MPN / 100 ml |
Tính toán | |
CFU được tính bằng cách đếm số lượng khuẩn lạc phát triển trên đĩa thạch. | MPN được tính bằng cách so sánh các mẫu âm và dương của các ống với bảng thống kê MPN. |
Kỹ thuật pha loãng nối tiếp | |
Pha loãng nối tiếp được thực hiện trước khi đặt mẫu lên đĩa thạch. | Pha loãng nối tiếp thường không được thực hiện khi tính MPN |
Phương pháp | |
Phương pháp tấm trải và phương pháp tấm đổ là hai loại phương pháp được thực hiện để lấy CFU. | Lên men nhiều ống là phương pháp được thực hiện để thu được giá trị MPN. |
Tóm tắt - CFU vs MPN
Việc đo lường sự phát triển của vi sinh vật là cần thiết vì nhiều lý do. Trong các nhà máy chế biến thực phẩm, cần phải đo mức độ & chủng loại vi sinh vật trong thực phẩm. Trong công nghiệp thực phẩm và y học, cần đảm bảo rằng các phương pháp xử lý tiệt trùng được áp dụng một cách hiệu quả. Trong các nhà máy xử lý nước thải, cần phải kiểm tra số lượng vi sinh vật thường xuyên. Khi tối ưu hóa quy trình trong sinh học phân tử, cần phải đo số lượng khuẩn lạc trên đĩa. Do đó, có sẵn các phương pháp đếm và đo lường tốc độ tăng trưởng khác nhau. CFU và MPN là hai phương pháp được áp dụng rộng rãi trong các lĩnh vực khác nhau. CFU là thước đo số lượng khuẩn lạc vi khuẩn và nấm còn sống có trong một mẫu nhất định. Nó được tính toán bằng cách sử dụng phương pháp đếm đĩa tiêu chuẩn hoặc phương pháp đếm đĩa khả thi. MPN là một phép đo khác thể hiện số lượng tế bào vi khuẩn có trong một thể tích nhất định của mẫu chất lỏng. Nó được tính toán bằng cách sử dụng phương pháp lên men nhiều ống và bảng MPN. Đây là sự khác biệt giữa CFU và MPN.
Tải xuống phiên bản PDF của CFU vs MPN
Bạn có thể tải xuống phiên bản PDF của bài viết này và sử dụng nó cho mục đích ngoại tuyến theo ghi chú trích dẫn. Vui lòng tải xuống phiên bản PDF tại đây Sự khác biệt giữa CFU và MPN.