Sự khác biệt chính - TLC và HPTLC
TLC và HPTLC là hai kỹ thuật hóa học được sử dụng để tách các thành phần không bay hơi trong một hỗn hợp. Sự khác biệt chính giữa TLC và HPTLC là vật liệu hấp thụ trong tấm TLC có các hạt lớn trong khi tấm HPTLC có các hạt vật liệu hấp phụ rất nhỏ.
TLC là sắc ký lớp mỏng. HPTLC là sắc ký lớp mỏng hiệu suất cao, là một kỹ thuật tiên tiến so với phương pháp TLC.
TLC là gì?
TLC hay sắc ký lớp mỏng là một kỹ thuật hóa học cơ bản dùng để tách các thành phần không bay hơi trong hỗn hợp. Thí nghiệm này được thực hiện bằng cách sử dụng các tấm kính, nhựa hoặc giấy. Tấm này được phủ một lớp mỏng xenlulo hoặc silica gel (một vật liệu hấp phụ). Lớp mỏng này được gọi là pha tĩnh của TLC. Tấm này được gọi là tấm TLC.
Trước khi thử nghiệm, đường cơ sở và đường trên cùng được đánh dấu bằng bút chì trên tấm TLC. Sau đó, mẫu được dò dọc theo đường này bằng ống mao dẫn. Sau đó, tấm TLC được đặt thẳng đứng trong một pha động. Pha động là dung môi (hoặc hỗn hợp dung môi) được đặt trong bình chứa. Khi đặt bản TLC vào pha động này, người ta phải giữ cho đường nền nằm trên lề của dung môi. Nếu không, mẫu sẽ bị hòa tan trong dung môi.
TấmTLC được phép ở trong pha động một thời gian. Sau đó, theo thời gian, pha động tăng lên trên tấm do hoạt động của mao dẫn. Nếu mẫu hòa tan trong pha động, nó sẽ tăng lên cùng với pha động.
Nguyên tắc “giống như hòa tan giống như” đằng sau phương pháp TLC này. Điều này có nghĩa là các hợp chất phân cực hòa tan trong dung môi phân cực trong khi các hợp chất không phân cực hòa tan trong dung môi không phân cực. Pha tĩnh thường là silica gel hoặc cellulose, là một hợp chất phân cực. Pha động được sử dụng là dung môi không phân cực như hexan. Do đó, nếu mẫu chứa bất kỳ thành phần không phân cực nào, các thành phần này sẽ di chuyển lên trên cùng với pha động. Các thành phần phân cực sẽ dính vào tấm. Trong số các thành phần chuyển động, các hợp chất không phân cực vừa phải sẽ di chuyển chậm trong khi các hợp chất không phân cực cao sẽ di chuyển nhanh chóng. Khi mặt trước của dung môi đã đến vạch trên cùng của tấm TLC, tấm được lấy ra và để khô.
Hình 01: Kỹ thuật TLC
Nếu các thành phần trong mẫu là các hợp chất có màu, thì trên đĩa sẽ có các đốm màu ở các vị trí khác nhau. Nhưng nếu các thành phần không có màu, một số kỹ thuật khác nên được sử dụng; ví dụ: phun ninhydrin để phát hiện amoniac hoặc amin (amin chính và amin thứ cấp).
HPTLC là gì?
HPTLC hay sắc ký lớp mỏng hiệu suất cao là hình thức nâng cao của sắc ký lớp mỏng (TLC). Độ phân giải và độ chính xác của HPTLC rất cao. Hầu hết các bước của kỹ thuật này có thể được tự động hóa.
Các tấm được sử dụng trong HPTLC chứa các hạt silica gel với kích thước rất nhỏ và mật độ đóng gói của gel trên tấm cao. Bề mặt của tấm nhẵn và cho khả năng phân tách hiệu quả. Phân tích nhanh hơn kỹ thuật TLC. Độ nhạy của phương pháp này cũng cao. Trong HPTLC, một số mẫu khác nhau có thể được tách ra trong cùng một đĩa mà không cần bất kỳ bước chuẩn bị mẫu nào.
Sự khác biệt giữa TLC và HPTLC là gì?
TLC so với HPTLC |
|
| TLC là sắc ký lớp mỏng. | HPTLC là sắc ký lớp mỏng hiệu suất cao. |
| Kỹ thuật | |
| Đây là một kỹ thuật hóa học cơ bản được sử dụng để tách các thành phần không bay hơi trong một hỗn hợp. | Đây là hình thức sắc ký lớp mỏng (TLC) tiên tiến. |
| Tấm | |
| Tấm TLC có thể được làm bằng giấy, nhựa hoặc thủy tinh được phủ bằng vật liệu hấp phụ có các hạt lớn. | Các tấmHPTLC có các hạt vật liệu hấp phụ rất nhỏ. |
| Độ phân giải | |
| Phương pháp TLC cho độ phân giải kém khi mẫu có các thành phần có đặc tính tương tự. | Phương pháp HPTLC cho độ phân giải cao. |
| Thời gian | |
| Kỹ thuật TLC là một kỹ thuật tốn nhiều thời gian. | HPTLC cho kết quả ở tốc độ cao hơn so với phương pháp TLC. |
Tóm tắt - TLC vs HPTLC
HPTLC là hình thức nâng cao của TLC. Sự khác biệt chính giữa TLC và HPTLC là tấm TLC có thể được làm bằng giấy, nhựa hoặc thủy tinh, được áp dụng với vật liệu hấp phụ có các hạt lớn trong khi tấm HPTLC có các hạt vật liệu hấp phụ rất nhỏ.
