Sự khác biệt chính - HPLC và HPTLC
Sự khác biệt chính giữa HPLC và HPTLC là HPLC cho phép phân tách định lượng các thành phần trong một mẫu trong khi HPTLC không cho phép phân tách định lượng các thành phần trong một mẫu.
Sắc ký là một phương pháp tách vật lý được sử dụng để tách và xác định các thành phần trong hỗn hợp. Cả HPLC và HPTLC đều là kỹ thuật sắc ký. HPLC là sắc ký lỏng hiệu năng cao. HPTLC là sắc ký lớp mỏng hiệu suất cao.
HPLC là gì?
HPLC là sắc ký lỏng hiệu năng cao. Nó là một kỹ thuật phân tích được sử dụng để tách, xác định và định lượng các thành phần trong một hỗn hợp. Trong kỹ thuật này, mẫu được hòa tan trong dung môi thích hợp. Sau đó, dung môi với mẫu được đưa qua một máy bơm với áp suất cho trước. Bơm được làm đầy bằng vật liệu hấp phụ rắn. Sau đó, một số thành phần liên kết mạnh với vật liệu hấp thụ trong khi các thành phần khác liên kết lỏng lẻo. Điều này làm cho các thành phần có tốc độ dòng chảy khác nhau qua máy bơm. Do đó, các thành phần có thể được tách ra một cách dễ dàng.
Hình 01: Hệ thống HPLC
Vật liệu hấp phụ lấp đầy máy bơm được gọi là pha tĩnh. Dung môi với mẫu hòa tan được gọi là pha động. Máy bơm được sử dụng trong kỹ thuật này được gọi là cột. Cột được lấp đầy bằng vật liệu hấp phụ, phổ biến nhất là các hạt silica. Kích thước của các hạt này có thể từ 2-50 μm. Quá trình phân tách bị ảnh hưởng bởi thành phần của pha động và nhiệt độ của hệ thống. Tương tác giữa pha tĩnh và thành phần trong mẫu có thể là tương tác kỵ nước, tương tác lưỡng cực-lưỡng cực, liên kết ion, v.v.
Áp suất hoạt động của HPLC cao hơn đáng kể so với áp suất của sắc ký lỏng truyền thống. Nó nằm khoảng 50-350 bar. Sự khác biệt giữa sắc ký lỏng và HPLC là trong sắc ký lỏng, mẫu rơi qua cột dưới trọng lực trong khi trong HPLC, mẫu được điều áp qua cột. Kích thước của cột và các hạt hấp thụ cũng rất nhỏ khi so sánh với sắc ký lỏng truyền thống. Tuy nhiên, độ phân giải được đưa ra bởi kỹ thuật HPLC là vượt trội hơn.
HPTLC là gì?
HPTLC là sắc ký lớp mỏng hiệu suất cao. Đây là hình thức nâng cao và tự động của TLC truyền thống. Kỹ thuật này cung cấp một giải pháp hiệu quả trong một khoảng thời gian ngắn. Trong phương pháp phân tích này, mẫu và đối chứng có thể được phân tích cùng một lúc, điều này cho phép so sánh mẫu với đối chứng. Nó cho độ chính xác phân tích được cải thiện hơn so với các kỹ thuật sắc ký khác. Thời gian dành cho việc phân tích ít hơn. Kỹ thuật này là một kỹ thuật chi phí thấp.
Hình 02: Phân tích Thuốc nhuộm thực phẩm sử dụng HPTLC
Phương pháp HPTLC là một quy trình đơn giản và bước chuẩn bị mẫu cũng bị loại bỏ (Trong TLC truyền thống, bước chuẩn bị mẫu được bao gồm trước khi tách. Bước này bao gồm làm sạch và làm giàu). Dung môi có thể được sử dụng trực tiếp mà không cần xử lý trước mặc dù các kỹ thuật sắc ký khác yêu cầu xử lý trước như khử khí, lọc, v.v.
Vật liệu hấp phụ được sử dụng trong HPTLC là silica với kích thước hạt rất nhỏ. Trong TLC truyền thống, kích thước hạt của silica là 5-20 μm trong khi trong HPTLC, nó là 4-8 μm. Mẫu được áp dụng cho tấm HPTLC bằng dụng cụ bôi. Nó cung cấp một ứng dụng đồng nhất và an toàn. Sau đó, các tấm được đặt trong một buồng có pha động. Buồng phải được bão hòa bằng hơi của pha động. Sau quá trình HPTLC, các điểm đã di chuyển có thể được phát hiện. Khi phát hiện các vết trên đĩa, kỹ thuật HPTLC sử dụng vùng UV thích hợp hoặc buồng chứa i-ốt.
Sự khác biệt giữa HPLC và HPTLC là gì?
HPLC vs HPTLC |
|
| HPLC là sắc ký lỏng hiệu suất cao. | HPTLC là sắc ký lớp mỏng hiệu suất cao. |
| Kỹ thuật | |
| Trong HPLC, pha động với dung môi được đưa qua cột chứa đầy pha tĩnh. | Trong HPTLC, mẫu được phát hiện trên đĩa TLC và được đặt bên trong buồng chứa pha động; sau đó mẫu được phép di chuyển lên trên tấm cùng với pha động. |
| Đo lường | |
| Trong HPLC, sự khác biệt giữa tốc độ dòng chảy của các thành phần qua cột được sử dụng để tách các thành phần trong mẫu. | Trong HPTLC, sự khác biệt giữa khoảng cách di chuyển của từng thành phần trong mẫu được sử dụng để tách các thành phần trong mẫu. |
| Tách định lượng | |
| HPLC cho phép tách định lượng các thành phần trong mẫu. | HPTLC không cho phép tách định lượng các thành phần trong mẫu. |
Tổng hợp - HPLC vs HPTLC
HPLC và HPTLC là hai kỹ thuật sắc ký. Sự khác biệt chính giữa HPLC và HPTLC là HPLC cho phép tách định lượng các thành phần trong mẫu trong khi HPTLC không cho phép tách định lượng các thành phần trong mẫu.
