Sự khác biệt chính - HPLC và LCMS
Đầu tiên chúng ta hãy xem xét ý nghĩa của HPLC và LCMS trước khi phân tích sự khác biệt giữa HPLC và LCMS. Sắc ký là một kỹ thuật tách trong phân tích hóa học, trong đó các thành phần mẫu được tách ra trong quá trình đi qua môi trường sắc ký. Nó cũng liên quan đến sự tương tác với mẫu, pha tĩnh và pha động. HPLC là viết tắt của High Performance Liquid Chromatography, và nó được sử dụng như một phương pháp sắc ký lỏng trong hóa học phân tích. Sự kết hợp giữa Sắc ký lỏng và Quang phổ khối (LCMS) đã được phát triển để phân tích định lượng các phân tử sinh học được chọn và nó là một quy trình xét nghiệm có độ nhạy cao, chính xác và đặc hiệu so với HPLC. Đây là điểm khác biệt chính giữa HPLC và LCMC. Bài viết này sẽ giới thiệu cho bạn về HPLC và LCMC liên quan đến phân tích hóa học và thảo luận về sự khác biệt giữa HPLC và LCMS.
HPLC là gì?
Sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) là một kỹ thuật tách phổ biến trong hóa phân tích. Nó chủ yếu được sử dụng để tách các thành phần, xác định và định lượng từng thành phần trong hỗn hợp. Trước đó, phương pháp này được gọi là sắc ký lỏng áp suất cao vì nó phụ thuộc vào các máy bơm để chảy dung môi lỏng có áp suất bao gồm hỗn hợp mẫu qua một cột chứa vật liệu hấp phụ rắn. Mỗi và mọi cấu tử trong hỗn hợp mẫu tương tác khác nhau với vật liệu hấp phụ rắn, dẫn đến tốc độ dòng chảy khác nhau đối với các cấu tử khác nhau. Điều này có thể dẫn đến sự phân tách của các thành phần khi chúng chảy ra khỏi cột HPLC.
HPLC đã được sử dụng cho các ứng dụng khác nhau như phân tích nồng độ vitamin D trong máu, sử dụng ma túy bất hợp pháp của các vận động viên bằng cách phát hiện dư lượng ma túy trong nước tiểu của họ, phân loại các thành phần của một mẫu sinh học phức tạp cho mục đích nghiên cứu và phân tích và sản xuất dược phẩm.
LCMS là gì?
Sắc ký lỏng-khối phổ (LCMS) là một kỹ thuật phân tích kết hợp khả năng phân tách vật lý của sắc ký lỏng với khả năng phân tích khối lượng của khối phổ (MS). Sắc ký lỏng là một kỹ thuật tách, và khối phổ được sử dụng để phân tích tỷ lệ khối lượng trên điện tích của các hạt mang điện. Sự phân tách vật lý thường đạt được bằng HPLC và cách khác, LCMS còn được gọi là HPLC-MS. LCMS là một kỹ thuật phân tích ưu thế có độ chính xác, độ nhạy và độ đặc hiệu rất cao so với HPLC. Do đó, nó rất hữu ích trong nhiều ứng dụng như mục đích nghiên cứu, phân tích thuốc, phân tích thực phẩm, … LCMS chủ yếu được sử dụng để tách, phát hiện, xác định và định lượng các đặc tính sinh hóa của một mẫu cụ thể khi có sự hiện diện của các hỗn hợp hóa học phức tạp.
Sự khác biệt giữa HPLC và LCMC là gì?
Từ viết tắt và định nghĩa của HPLC và LCMC
HPLC: HPLC là viết tắt của High-Performance Liquid Chromatography. Đây là một kỹ thuật tách chủ yếu được sử dụng để tách các thành phần, xác định và định lượng từng thành phần trong hỗn hợp.
LCMS: LCMS là viết tắt của Liquid Chromatography and Mass Spectrometry. Đây là một kỹ thuật phân tích kết hợp khả năng phân tách vật lý của sắc ký lỏng với khả năng phân tích khối lượng của khối phổ (MS).
Đặc điểm của HPLC và LCMC
Phân loại
HPLC: Đây chỉ là phương pháp Sắc ký lỏng.
LCMS: Đây là sự kết hợp giữa phương pháp Sắc ký lỏng và phương pháp Khối phổ.
Hiệu quả
HPLC: So với LCMS, phân tích HPLC kém hiệu quả hơn và chậm hơn.
LCMS: So với HPLC, phân tích LCMS hiệu quả và nhanh hơn.
Nhạy cảm
HPLC: So với LCMS, phân tích HPLC kém nhạy hơn.
LCMS: So với HPLC, phân tích LCMS nhạy hơn.
Tính cụ thể
HPLC: So với LCMS, phân tích HPLC ít cụ thể hơn.
LCMS: So với HPLC, phân tích LCMS cụ thể hơn.
Chính xác
HPLC: HPLC cho kết quả kém chính xác hơn LCMS để xác định một số hóa chất.
LCMS: LCMS cho kết quả chính xác hơn HPLC để xác định một số hóa chất.
Thành phần
HPLC: HPLC có thể được coi là một thành phần của LCMS.
LCMS: LCMS không thể được coi là một thành phần của HPLC.
Nguồn Ion
HPLC: Nguồn ion không tồn tại trong thiết bị HPLC.
LCMS: Nguồn ion có trong thiết bị LCMS.
Ứng dụng
HPLC: Các ion, polyme, phân tử hữu cơ và phân tử sinh học có thể được phân tích bằng HPLC.
LCMS: Có thể phân tích các phân tử hữu cơ và phân tử sinh học. Tương phản với HPLC, LCMS có thể được sử dụng để kiểm tra các hỗn hợp được phân giải không hoàn toàn.
Hoạt động
HPLC: Sơ đồ của dụng cụ HPLC được cho trong hình 1 và nó thường bao gồm bộ lấy mẫu tự động, máy bơm và máy dò. Bộ lấy mẫu đưa hỗn hợp mẫu vào pha động (hỗn hợp có áp suất của các dung môi như nước, axetonitril và / hoặc metanol) để chuyển nó vào cột. Các máy bơm cung cấp lưu lượng và thành phần mong muốn của pha động qua cột. Cột được lấp đầy bởi chất hấp phụ, là một hạt rắn dạng hạt như silica hoặc polyme. Máy dò tạo ra tín hiệu tương ứng với lượng hiện diện của thành phần mẫu trong cột, do đó cho phép phân tích định lượng được các thành phần mẫu đã chọn. Thiết bị HPLC được điều khiển và phân tích dữ liệu được cung cấp bởi bộ vi xử lý kỹ thuật số và phần mềm người dùng.
Hình 1: Sơ đồ thiết bị HPLC
LCMS: Sơ đồ của thiết bị LCMS được cho trong hình 2. Phần chiết mẫu được đưa vào cột bao gồm HPLC. Cột này giữ lại các chất chuyển hóa mẫu dựa trên các ký tự vật lý, và các chất chuyển hóa khác nhau chảy đến khối phổ ở những khoảng thời gian khác nhau. Khối phổ được sử dụng để đánh giá khối lượng của các hạt, để xác định sự sắp xếp nguyên tố của một phân tử và để làm rõ cấu trúc phân tử. Tuy nhiên, mẫu phải được ion hóa để tạo ra các phân tử tích điện nhằm xác định tỷ lệ khối lượng trên điện tích của chúng. Do đó, thay vì dụng cụ HPLC, LCMS bao gồm ba mô-đun bổ sung như nguồn sắt, máy phân tích khối lượng và máy dò. Nguồn ion có thể biến đổi mẫu pha khí thành ion và máy phân tích khối lượng nhóm các ion theo khối lượng của chúng bằng cách sử dụng điện từ trường. Cuối cùng, một máy dò định lượng các giá trị và cung cấp dữ liệu của từng ion có trong mẫu. Kỹ thuật LCMS có thể được sử dụng cho cả ứng dụng định tính và định lượng.
Hình 2: Sơ đồ thiết bị LCMS
Tóm lại, HPLC là một phương pháp sắc ký lỏng trong khi LCMS là sự kết hợp của sắc ký lỏng và khối phổ. Cả hai kỹ thuật phân tích này đều có các đặc điểm khác nhau, nhưng chúng có thể được sử dụng để xác định và định lượng các chế phẩm thực phẩm, dược phẩm và các phân tử hoạt tính sinh học khác.
