Sự khác biệt chính giữa HPLC pha đảo và pha bình thường là HPLC pha ngược sử dụng pha tĩnh không phân cực và pha động có cực trong khi HPLC pha bình thường sử dụng pha tĩnh phân cực và pha động ít phân cực hơn.
HPLC pha bình thường là kỹ thuật lâu đời nhất của HPLC mà Tswett đã sử dụng trong quá trình tách chiết xuất thực vật của mình; ông đã sử dụng phấn trong một cột thủy tinh. Đây là phương thức sắc ký cổ điển dẫn đến việc đặt tên cho nó là kỹ thuật “bình thường”. Mặt khác, HPLC pha đảo ngược ngược lại với kỹ thuật thông thường mà các nhà khoa học đã phát triển gần đây.
HPLC Pha Ngược là gì?
Pha ngược HPLC là một kỹ thuật sắc ký trong đó chúng tôi sử dụng pha tĩnh kỵ nước. Trong số tất cả các phương pháp HPLC, chúng tôi sử dụng phương pháp này cho khoảng 70% vì khả năng ứng dụng rộng rãi và khả năng tái tạo của nó. Pha tĩnh là không phân cực và pha động là phân cực.
Thông thường, các nhà khoa học sử dụng hỗn hợp nước của nước với dung môi hữu cơ phân cực, dễ trộn lẫn, chẳng hạn như axetonitril hoặc metanol làm pha động. Do đó, các chất phân tích tương tác với pha tĩnh không phân cực.
HPLC Pha Bình thường là gì?
HPLC pha thường là một kỹ thuật sắc ký trong đó chúng tôi sử dụng pha tĩnh ưa nước. Đây là phương pháp truyền thống của HPLC, mặc dù chúng tôi không sử dụng nó nhiều. Pha tĩnh là phân cực và pha động là không phân cực. Quan trọng hơn, pha động của kỹ thuật này là 100% hữu cơ. Có nghĩa là không có nước được sử dụng cho việc này.
Hình 01: Sơ đồ mẫu cho sắc ký đồ HPLC pha bình thường và pha đảo theo độ phân cực của các thành phần trong chất phân tích.
Thông thường, pha tĩnh chứa silica, xyano, diol, pha liên kết amin, v.v. Pha động bao gồm các dung môi hữu cơ như hexan, etyl axetat, v.v. Kỹ thuật này dựa trên việc lưu giữ các phân tử dung môi hoặc chất phân tích trên pha tĩnh cực.
Sự khác biệt giữa HPLC Pha Đảo ngược và Pha Bình thường là gì?
Pha ngược HPLC là một kỹ thuật sắc ký trong đó chúng tôi sử dụng pha tĩnh kỵ nước. Pha tĩnh của kỹ thuật này là không phân cực trong khi pha động là phân cực. Hơn nữa, các nhà khoa học sử dụng hỗn hợp nước của nước với dung môi hữu cơ phân cực, dễ trộn lẫn, chẳng hạn như axetonitril hoặc metanol làm pha động trong HPLC pha ngược. Ngược lại, HPLC pha thường là một kỹ thuật sắc ký trong đó chúng ta sử dụng pha tĩnh ưa nước. Pha tĩnh của kỹ thuật này là phân cực trong khi pha động là không phân cực. Ngoài ra, các nhà khoa học sử dụng các dung môi hữu cơ như hexan, etyl axetat, … làm pha động của HPLC pha thường. Đồ họa thông tin dưới đây trình bày sự khác biệt giữa HPLC pha ngược và pha bình thường ở dạng bảng.
Tóm tắt - Pha ngược so với Pha bình thường HPLC
Kỹ thuật HPLC pha ngược và pha thường là hai kỹ thuật sắc ký lỏng. Sự khác biệt cơ bản giữa HPLC pha ngược và pha bình thường là HPLC pha ngược sử dụng pha tĩnh không phân cực và pha động có cực trong khi HPLC pha bình thường sử dụng pha tĩnh có cực và pha động ít phân cực hơn.
