Sự khác biệt chính giữa RP HPLC và HIC là RP HPLC sử dụng pha động phân cực hơn và pha tĩnh ít phân cực hơn. Trong khi đó, HIC sử dụng pha tĩnh kỵ nước cho phép các phân tử kỵ nước gắn vào nó.
Sắc ký là một kỹ thuật phân tích giúp tách hỗn hợp thành các thành phần của nó. Đầu tiên, chúng ta phải hòa tan mẫu cần tách thành dung dịch. Hỗn hợp dung dịch-chất này được gọi là pha động. Sau đó, pha động được đưa qua một vật liệu khác được gọi là pha tĩnh. Pha tĩnh quyết định sự phân tách của các thành phần. Sự phân tách xảy ra do sự phân chia vật chất giữa pha động và pha tĩnh.
RP HPLC là gì?
Thuật ngữ RP HPLC là viết tắt của Reverse Phase High-Performance Chromatography. Nó liên quan đến việc tách các thành phần trong hỗn hợp, theo tính kỵ nước. Các thành phần kỵ nước trong pha động liên kết với các phối tử kỵ nước cố định trên pha tĩnh, trong khi các thành phần ưa nước rửa giải qua pha tĩnh mà không bị dính vào bề mặt của pha tĩnh.
Hình 01: Thiết bị HPLC
Hơn nữa, phương pháp này có khả năng tái tạo cao hơn so với các kỹ thuật sắc ký khác, và nó cũng cho thấy khả năng ứng dụng rộng rãi. Do đó, chúng tôi sử dụng phương pháp này trong phòng thí nghiệm cho hơn 75% tất cả các phương pháp HPLC. Hầu hết thời gian, chúng tôi sử dụng hỗn hợp nước của nước với dung môi hữu cơ phân cực có thể trộn lẫn làm pha động. Do đó, nó sẽ đảm bảo sự gắn kết của các thành phần kỵ nước trong dung dịch vào bề mặt của pha tĩnh.
HIC là gì?
Thuật ngữ HIC là viết tắt của Hydrophobic Interaction Chromatography. Nó là một loại HPLC pha ngược và phương pháp này được sử dụng chủ yếu để tách các phân tử sinh học lớn như protein. Trong phương pháp này, chúng ta cần sử dụng môi trường nước để tạo mẫu phân tử sinh học. Đó là vì dung môi hữu cơ có thể gây biến tính protein. Hơn nữa, kỹ thuật này sử dụng sự tương tác giữa các phân tử lớn với bề mặt hơi kỵ nước của pha tĩnh. Hơn nữa, chúng tôi phải sử dụng nồng độ muối cao trong mẫu vì nó khuyến khích protein được giữ lại trên bao bì; quá trình này được gọi là quá trình ướp muối. Bằng cách giảm dần nồng độ muối, chúng ta có thể làm cho các phân tử sinh học rửa giải riêng biệt tùy theo tính kỵ nước của chúng.
Thông thường, phương pháp này sử dụng các điều kiện ngược lại với điều kiện của sắc ký trao đổi ion. Trong kỹ thuật này, đầu tiên, chúng ta cần cho một dung dịch đệm qua cột để làm giảm độ hòa tan của chất tan trong mẫu. Nó làm cho các vùng kỵ nước của protein lộ ra. Tuy nhiên, khi phân tử kỵ nước hơn, cần ít muối hơn để thúc đẩy liên kết. Ở đây, các chất tan ít kỵ nước hơn được rửa giải trước và theo sự thay đổi nồng độ muối, các chất tan ít kỵ nước hơn được rửa giải sau cùng.
Sự khác biệt giữa RP HPLC và HIC là gì?
Sắc ký là một kỹ thuật phân tích để tách các thành phần trong một hỗn hợp. RP HPLC và HIC là hai kỹ thuật sắc ký chuyên dụng. Sự khác biệt chính giữa RP HPLC và HIC là RP HPLC sử dụng pha động phân cực hơn và pha tĩnh ít phân cực hơn, trong khi HIC sử dụng pha tĩnh kỵ nước, cho phép các phân tử kỵ nước gắn vào nó.
Infographic dưới đây tóm tắt sự khác biệt giữa RP HPLC và HIC.
Tóm tắt - RP HPLC so với HIC
Sắc ký là một kỹ thuật phân tích để tách các thành phần trong một hỗn hợp. RP HPLC và HIC là hai kỹ thuật sắc ký chuyên dụng. Sự khác biệt chính giữa RP HPLC và HIC là RP HPLC sử dụng pha động phân cực hơn và pha tĩnh ít phân cực hơn, trong khi HIC sử dụng pha tĩnh kỵ nước, cho phép các phân tử kỵ nước gắn vào nó.
