Sự khác biệt chính giữa kết tủa miễn dịch và kết tủa đồng là kết tủa miễn dịch là kỹ thuật kết tủa protein ra khỏi dung dịch bằng cách sử dụng một kháng thể cụ thể, trong khi kết tủa đồng là kỹ thuật kết tủa phức hợp protein nguyên vẹn ra khỏi dung dịch bằng cách sử dụng một kháng thể cụ thể.
Tương tác kháng nguyên-kháng thể là tương tác hóa học cụ thể giữa kháng thể do tế bào B sản xuất và kháng nguyên (protein) trong một phản ứng miễn dịch. Thông thường, các kháng nguyên hòa tan kết hợp với các kháng thể hòa tan trong sự hiện diện của chất điện ly ở nhiệt độ hòa tan và pH để tạo ra một phức chất có thể nhìn thấy được không hòa tan. Đây được gọi là phản ứng tạo kết tủa. Vì vậy, kết tủa miễn dịch và kết tủa đồng là hai loại phản ứng kết tủa thường được sử dụng trong phòng thí nghiệm để xác định các protein như kháng nguyên.
Kết tủa miễn dịch là gì?
Kết tủa miễn dịch là một kỹ thuật kết tủa một protein ra khỏi dung dịch bằng cách sử dụng một kháng thể cụ thể. Đôi khi, kỹ thuật này còn được gọi là kết tủa miễn dịch protein riêng lẻ. Kết tủa miễn dịch sử dụng một kháng thể để phân lập một protein được chọn lọc quan tâm từ dịch ly giải của tế bào. Kháng thể làm sạch protein hoặc kháng nguyên đích cụ thể của nó từ một hỗn hợp. Kháng thể liên kết với protein và phức hợp kháng thể-kháng nguyên được kéo ra khỏi mẫu. Trong thiết lập thử nghiệm, phức hợp kháng nguyên-kháng thể được rút ra bằng cách sử dụng protein A / G kết hợp với agarose hoặc các hạt từ tính. Sau đó, các hạt được rửa sạch và protein quan tâm được rửa giải. Protein hoặc kháng nguyên tinh khiết thu được bằng kết tủa miễn dịch được xác minh bằng nhiều kỹ thuật như xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với enzym (ELISA) và Western blot (WB).
Hình 01: Lượng mưa miễn dịch
Hơn nữa, các protein hoặc kháng nguyên phân lập có thể được định lượng và xác định thông qua khối phổ bằng cách sử dụng các mẫu phân hủy bằng enzym dựa trên trình tự chính. Có một số cân nhắc trước khi bắt đầu thử nghiệm kết tủa miễn dịch: lựa chọn định dạng phương pháp, liên kết protein và hạt, chọn kháng thể và isotype chính phù hợp, và kiểm soát âm tính.
Coimmunoprecipitation là gì?
Coimmunoprecipitation là kỹ thuật kết tủa các phức hợp protein nguyên vẹn ra khỏi dung dịch bằng cách sử dụng một kháng thể cụ thể. Coimmunoprecipitation thường hoạt động bằng cách chọn một kháng thể cụ thể nhắm vào một protein (kháng nguyên) đã biết, được cho là thành viên của một phức hợp protein lớn hơn. Bằng cách nhắm mục tiêu vào cấu tử đã biết bằng một kháng thể cụ thể, có thể kéo toàn bộ phức hợp protein ra khỏi dung dịch. Điều này cho phép xác định các thành viên chưa biết của phức hợp. Khái niệm kéo phức hợp protein ra khỏi dung dịch đôi khi được gọi là cơ chế "kéo xuống".
Hình 02: B Coimmunoprecipitation
Coimmunoprecipitation là một kỹ thuật mạnh mẽ được sử dụng để phân tích tương tác protein-protein. Mục đích chính của quá trình đồng kết tủa là xác định các đối tác tương tác như phối tử, đồng yếu tố hoặc các phân tử tín hiệu đến protein quan tâm. Hơn nữa, kết tủa đồng là một kỹ thuật hiệu quả được sử dụng để tách protein khỏi huyết thanh, dịch ly giải tế bào, mô đồng nhất hoặc môi trường điều hòa.
Sự tương đồng giữa kết tủa miễn dịch và kết tủa đồng thời là gì?
- Kết tủa miễn dịch và kết tủa đồng thời là hai loại kỹ thuật dựa trên phản ứng kết tủa.
- Cả hai kỹ thuật đều có thể được sử dụng để xác định kháng nguyên đích thông qua một kháng thể cụ thể.
- Cả hai kỹ thuật đều phụ thuộc mạnh mẽ vào sự tương tác giữa kháng nguyên và kháng thể.
- Chúng thường được sử dụng trong các phòng thí nghiệm lâm sàng.
Sự khác biệt giữa kết tủa miễn dịch và kết tủa đồng thời là gì?
Kết tủa miễn dịch là một kỹ thuật kết tủa một protein ra khỏi dung dịch bằng cách sử dụng một kháng thể cụ thể, trong khi kết tủa đồng thời là một kỹ thuật kết tủa các phức hợp protein nguyên vẹn ra khỏi dung dịch bằng cách sử dụng một kháng thể cụ thể. Vì vậy, đây là sự khác biệt chính giữa kết tủa miễn dịch và kết tủa đồng thời. Hơn nữa, kết tủa miễn dịch được sử dụng phổ biến hơn trong các phòng thí nghiệm, trong khi kết tủa đồng tương không được sử dụng phổ biến trong các phòng thí nghiệm.
Đồ họa thông tin dưới đây trình bày sự khác biệt giữa kết tủa miễn dịch và kết tủa đồng thời ở dạng bảng để so sánh song song.
Tóm tắt - Kết tủa miễn dịch so với Kết tủa đồng thời
Kết tủa miễn dịch và kết tủa đồng thời là hai loại kỹ thuật dựa trên phản ứng kết tủa phụ thuộc vào sự tương tác giữa kháng nguyên và kháng thể. Kỹ thuật kết tủa miễn dịch kết tủa một protein ra khỏi dung dịch bằng cách sử dụng một kháng thể cụ thể, trong khi kỹ thuật kết tủa đồng thời kết tủa các phức hợp protein nguyên vẹn ra khỏi dung dịch bằng cách sử dụng một kháng thể cụ thể. Vì vậy, điều này tóm tắt sự khác biệt giữa kết tủa miễn dịch và kết tủa đồng thời.
