Sự khác biệt chính - Miễn dịch huỳnh quang và Hóa mô miễn dịch
Chẩn đoán bệnh, sử dụng các phương pháp sinh học phân tử, đã trở thành một lĩnh vực mới nổi của công nghệ phòng thí nghiệm lâm sàng. Nó bao gồm tất cả các xét nghiệm và phương pháp để xác định bệnh và hiểu nguyên nhân của bệnh bằng cách phân tích DNA, RNA hoặc các protein biểu hiện trong một sinh vật. Những tiến bộ nhanh chóng trong chẩn đoán phân tử đã cho phép nghiên cứu cơ bản về các bệnh truyền nhiễm và không lây nhiễm. Chúng được sử dụng để xác định những thay đổi về trình tự hoặc mức độ biểu hiện trong các gen hoặc protein quan trọng liên quan đến bệnh tật. Miễn dịch huỳnh quang (IF) và Hóa mô miễn dịch (IHC) là hai kỹ thuật được sử dụng rộng rãi trong sinh học ung thư. IF là một loại IHC trong đó phương pháp phát hiện huỳnh quang được sử dụng để phân tích các kháng thể đơn dòng và đa dòng, trong khi IHC sử dụng các phương pháp dựa trên hóa học để phát hiện các kháng thể đơn dòng và đa dòng. Đây là điểm khác biệt chính giữa IF và IHC.
Miễn dịch huỳnh quang (IF) là gì?
Miễn dịch huỳnh quang là một kỹ thuật phát hiện trong đó các kháng thể được sử dụng trong xét nghiệm được đánh dấu bằng cách sử dụng thuốc nhuộm huỳnh quang hoặc protein huỳnh quang cho mục đích phát hiện. Các kháng thể thứ cấp được gắn nhãn có thể dẫn đến các tín hiệu nền không mong muốn; do đó, kỹ thuật IF dựa trên việc ghi nhãn chính kháng thể chính hiện tại để tránh các tín hiệu không mong muốn trong quá trình phát hiện. Thông qua kỹ thuật này, sự gắn kết không đặc hiệu giữa kháng thể chính và kháng thể thứ cấp được ngăn chặn, và nó nhanh chóng hơn vì không có bước ủ bệnh thứ cấp liên quan. Chất lượng dữ liệu cũng được cải thiện.
Hình 01: Nhuộm miễn dịch huỳnh quang kép cho BrdU, NeuN và GFAP
Fluorochromes hay thuốc nhuộm huỳnh quang là những hợp chất có thể hấp thụ bức xạ, tốt nhất là bức xạ cực tím có tính kích thích. Khi các hạt đạt trạng thái cơ bản từ trạng thái kích thích, chúng phát ra bức xạ được một máy dò bắt và phát hiện để tạo thành quang phổ. Điều quan trọng là nhãn huỳnh quang phải tương thích và ổn định đối với phản ứng cụ thể và nó phải được liên hợp đúng cách với kháng thể để thu được kết quả chính xác. Một trong những fluorochromes được sử dụng nhiều nhất là fluorescein isothiocyanate (FITC), có màu xanh lục, với bước sóng đỉnh hấp thụ và phát xạ lần lượt là 490 nm và 520 nm. Rhodamine, một tác nhân khác được sử dụng trong IF, có màu đỏ và có bước sóng đỉnh hấp thụ và phát xạ riêng biệt là 553 nm và 627 nm.
Hóa mô miễn dịch (IHC) là gì?
IHC là một phương pháp thử nghiệm phân tử được thực hành để xác định và xác nhận sự hiện diện của kháng nguyên trong tế bào đích. Tế bào đích có thể là một hạt lây nhiễm, một mầm bệnh vi sinh vật hoặc một tế bào khối u ác tính. IHC sử dụng các kháng thể đơn dòng và đa dòng để xác định sự hiện diện của các kháng nguyên có trên bề mặt tế bào của tế bào đích. Kỹ thuật này dựa trên liên kết kháng nguyên-kháng thể. Dấu hiệu phát hiện được kết hợp với các kháng thể này để phát hiện sự có mặt hoặc không có của kháng nguyên cụ thể. Các dấu hiệu này có thể là dấu hiệu hóa học như enzym, kháng thể được gắn thẻ huỳnh quang hoặc kháng thể được đánh dấu vô tuyến.
Hình 02: Lát não chuột nhuộm bằng Hóa mô miễn dịch
Ứng dụng phổ biến nhất của IHC là trong sinh học tế bào ung thư để xác định sự hiện diện của các khối u ác tính, nhưng nó cũng được sử dụng để phát hiện các bệnh truyền nhiễm.
Điểm giống nhau giữa miễn dịch huỳnh quang và hóa mô miễn dịch là gì?
- Miễn dịch huỳnh quang và hóa mô miễn dịch diễn ra trong điều kiện in vitro.
- Cả hai kỹ thuật đều dựa trên kháng nguyên-kháng thể
- Cả hai đều là những kỹ thuật rất nhanh.
- Kết quả của các kỹ thuật có thể tái tạo.
- Cả hai đều có chất lượng dữ liệu được cải thiện.
- Những kỹ thuật này được sử dụng trong chẩn đoán ung thư và các bệnh truyền nhiễm.
Sự khác biệt giữa miễn dịch huỳnh quang và hóa mô miễn dịch là gì?
Miễn dịch huỳnh quang vs Hóa mô miễn dịch |
|
IF là một kỹ thuật phát hiện trong đó các kháng thể được sử dụng trong xét nghiệm được đánh dấu bằng cách sử dụng thuốc nhuộm huỳnh quang hoặc protein huỳnh quang để phát hiện. | IHC là một kỹ thuật phát hiện trong đó các kháng thể được sử dụng trong xét nghiệm được dán nhãn bằng cách sử dụng các hóa chất hoặc nguyên tố phóng xạ để phát hiện. |
Độ chính xác | |
Độ chính xác cao hơn trong kỹ thuật IF so với IHC. | Độ chính xác thấp hơn trong IHC. |
Tính cụ thể | |
IF cụ thể hơn. | IHC ít cụ thể hơn. |
Tóm tắt - Miễn dịch huỳnh quang vs Hóa mô miễn dịch
Cơ chế phân tử đã mang lại nhiều thay đổi trong lĩnh vực y học, làm nảy sinh các phương pháp kiểm tra phân tử tiên tiến đã mang lại những cuộc cách mạng trong lĩnh vực chẩn đoán. Những phát minh này đã dẫn đến việc xác định và xác định bệnh nhanh chóng, chính xác, từ đó cho phép quản lý và sản xuất thuốc thành công. Các kỹ thuật này cũng được sử dụng trong dược lý học để tìm mục tiêu của thuốc và xác nhận các đặc tính dược động học của thuốc trong quá trình chuyển hóa thuốc. IF và IHC là hai phương pháp chẩn đoán dựa trên khái niệm liên kết kháng nguyên và kháng thể, mặc dù phương thức phát hiện trong cả hai kỹ thuật khác nhau. IF sử dụng nguyên tắc huỳnh quang để phát hiện kháng nguyên và IHC sử dụng khái niệm liên hợp hóa học để phát hiện kháng nguyên. Đây là sự khác biệt giữa IF và IHC.
Tải xuống Phiên bản PDF của Miễn dịch huỳnh quang vs Hóa mô miễn dịch
Bạn có thể tải xuống phiên bản PDF của bài viết này và sử dụng nó cho mục đích ngoại tuyến theo ghi chú trích dẫn. Vui lòng tải xuống phiên bản PDF tại đây Sự khác biệt giữa Miễn dịch huỳnh quang và Hóa mô miễn dịch.