Sự khác biệt chính giữa ELISA cạnh tranh và không cạnh tranh là ELISA cạnh tranh sử dụng kháng nguyên ức chế trong khi ELISA không cạnh tranh không sử dụng kháng nguyên ức chế cho xét nghiệm.
Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) là một xét nghiệm miễn dịch phát hiện các mục tiêu khác nhau như kháng thể, kháng nguyên, protein và glycoprotein. Đó là một phương pháp nhanh chóng và đơn giản để thực hiện. Do đó, nó thường được sử dụng cho các mục đích nghiên cứu và chẩn đoán. ELISA liên quan đến việc sử dụng các enzym và liên kết đặc hiệu của kháng thể và kháng nguyên. Dựa trên cách các phản ứng xảy ra, có bốn loại ELISA: ELISA trực tiếp, ELISA gián tiếp, ELISA bánh mì, và ELISA ức chế. ELISA trực tiếp, gián tiếp và kẹp là các loại ELISA không cạnh tranh trong khi ELISA ức chế là một loại ELISA bổ sung. Mục đích chính của bài viết này là thảo luận về sự khác biệt giữa ELISA cạnh tranh và không cạnh tranh.
ELISA Cạnh tranh là gì?
ELISA cạnh tranh đo nồng độ kháng nguyên trong mẫu thông qua việc phát hiện nhiễu tín hiệu. Ở đây, xét nghiệm sử dụng một kháng nguyên ức chế. Do đó, nó là một loại ELISA ức chế. Trong quy trình này, các kháng nguyên có trong mẫu sẽ cạnh tranh với kháng nguyên tham chiếu đã chọn để liên kết với một lượng kháng thể được đánh dấu cụ thể. Hơn nữa, quy trình này bắt đầu bằng việc ủ mẫu với lượng kháng thể được đánh dấu dư thừa. Ngoài ra, kháng nguyên tham chiếu nên được phủ trước trên đĩa xét nghiệm nhiều giếng. Sau đó, hỗn hợp mẫu phải được thêm vào đĩa xét nghiệm có chứa kháng nguyên đối chứng. Các kháng thể tự do sẽ liên kết với kháng nguyên tham chiếu tùy thuộc vào lượng kháng nguyên trong mẫu. Do đó, nếu có nhiều kháng nguyên mẫu thì sẽ phát hiện được ít kháng nguyên tham chiếu hơn. Do đó, nó tạo ra một tín hiệu yếu hơn.
Hình 01: ELISA
Ngược lại, khi mẫu chứa ít kháng nguyên, càng nhiều kháng nguyên tham chiếu sẽ chiếm các kháng thể và cho tín hiệu mạnh. Vì ELISA cạnh tranh cho tín hiệu mạnh hơn khi mẫu chứa một lượng kháng nguyên thấp, nên ELISA cạnh tranh là một xét nghiệm rất nhạy cảm, ngay cả đối với các mẫu có số lượng kháng nguyên nhỏ.
Trong một số bộ dụng cụ ELISA cạnh tranh, kháng nguyên được đánh dấu được sử dụng thay vì kháng thể được đánh dấu. Tại đây, kháng nguyên được đánh dấu và kháng nguyên mẫu sẽ cạnh tranh để gắn kết với kháng thể chính. Tương tự, khi lượng kháng nguyên trong mẫu thấp, lượng kháng nguyên được đánh dấu gắn với kháng thể sẽ cao hơn và tạo ra tín hiệu mạnh hơn.
ELISA Không Cạnh tranh là gì?
Trong số bốn loại ELISA, ba loại là ELISA không cạnh tranh. Đó là ELISA trực tiếp, ELISA gián tiếp và ELISA bánh mì. Cả ba định dạng đều hoạt động theo nguyên tắc chung của ELISA với sự khác biệt nhỏ trong phương pháp luận của chúng.
ELISA trực tiếp sử dụng kháng thể chính được đánh dấu bằng enzym. Do đó, nó không yêu cầu kháng thể thứ cấp. Do đó, ELISA trực tiếp nhanh hơn các loại ELISA khác. Kháng thể chính sẽ liên kết trực tiếp với kháng nguyên đích bất động có trong đĩa. Do đó, phản ứng enzyme-cơ chất sẽ diễn ra, tạo ra một tín hiệu có thể nhìn thấy được.
Hình 02: Sandwich ELISA
Không giống như ELISA trực tiếp, ELISA gián tiếp sử dụng một kháng thể chính không được gắn nhãn và một kháng thể thứ cấp được đánh dấu bằng enzym. Một khi kháng thể sơ cấp liên kết với kháng nguyên cố định, thì kháng thể thứ cấp sẽ liên kết với kháng thể sơ cấp. Enzyme trong kháng thể thứ cấp sẽ phản ứng với kháng nguyên và tạo ra tín hiệu có thể nhìn thấy được. Sandwich ELISA khác với ELISA trực tiếp và gián tiếp. Tại đây, kháng thể được cố định vào thành của đĩa xét nghiệm.
Điểm giống nhau giữa ELISA Cạnh tranh và Không Cạnh tranh là gì?
- ELISA cạnh tranh và không cạnh tranh là hai loại kỹ thuật xét nghiệm hấp thụ miễn dịch.
- Đây là những kỹ thuật rất linh hoạt và nhạy bén.
- Hơn nữa, cả ELISA cạnh tranh và không cạnh tranh đều là xét nghiệm miễn dịch liên kết với enzym.
- Ngoài ra, cả hai phương pháp đều tạo ra tín hiệu do phản ứng enzym-cơ chất.
Sự khác biệt giữa ELISA Cạnh tranh và Không Cạnh tranh là gì?
ELISA cạnh tranh là một loại ELISA dựa trên sự hoàn thiện giữa kháng nguyên của chất phân tích và kháng nguyên được đánh dấu cho một lượng giới hạn của kháng thể cụ thể. Mặt khác, không có sự cạnh tranh như vậy giữa kháng nguyên quan tâm và kháng nguyên tham chiếu trong ELISA không cạnh tranh. Do đó, đây là điểm khác biệt chính giữa ELISA cạnh tranh và không cạnh tranh. Tương tự, ELISA cạnh tranh là ELISA ức chế trong khi ELISA không cạnh tranh không phải là ELISA ức chế. Vì vậy, đây cũng là sự khác biệt giữa ELISA cạnh tranh và không cạnh tranh.
Hơn nữa, ELISA cạnh tranh phù hợp hơn để đo lượng kháng nguyên quan tâm thấp. Đó là một phương pháp nhạy cảm. Mặt khác, ELISA không cạnh tranh không phụ thuộc vào số lượng kháng nguyên có trong mẫu. Do đó, đây cũng là điểm khác biệt giữa ELISA cạnh tranh và không cạnh tranh.
Đồ họa thông tin dưới đây giải thích sự khác biệt giữa ELISA cạnh tranh và không cạnh tranh so sánh.
Tóm tắt - ELISA Cạnh tranh và Không Cạnh tranh
ELISA cạnh tranh và không cạnh tranh là hai loại xét nghiệm chính của ELISA hoặc xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với enzym. Tóm lại sự khác biệt giữa ELISA cạnh tranh và không cạnh tranh, ELISA cạnh tranh dựa trên sự cạnh tranh giữa kháng nguyên quan tâm và kháng nguyên tham chiếu đối với số lượng kháng thể giới hạn. Do đó, ELISA cạnh tranh còn được đặt tên là ELISA ức chế. Mặt khác, ELISA không cạnh tranh không dựa vào sự cạnh tranh giữa kháng nguyên đích và kháng nguyên tham chiếu. Nó sử dụng lượng kháng thể đặc hiệu được đánh dấu vượt quá đối với chất phân tích cần quan tâm. Do đó, đây là điểm khác biệt chính giữa ELISA cạnh tranh và không cạnh tranh. ELISA trực tiếp, ELISA gián tiếp và ELISA bánh mì là ba loại chính của ELISA không cạnh tranh.
