Sự khác biệt chính giữa các đầu dò phóng xạ và không phóng xạ là các đầu dò phóng xạ là chuỗi DNA hoặc RNA sợi đơn được đánh dấu bằng đồng vị phóng xạ trong khi các đầu dò không phóng xạ là chuỗi DNA hoặc RNA sợi đơn được đánh dấu bằng thẻ hóa học hoặc thẻ huỳnh quang.
Lainucleic acid là một kỹ thuật quan trọng trong sinh học phân tử, đặc biệt là trong chẩn đoán vi sinh vật. Nó giúp xác định hoặc phát hiện một trình tự axit nucleic cụ thể. Trong kỹ thuật này, các axit nucleic được cố định trên một bề mặt rắn và được lai với một mẫu dò. Mẫu dò là một đoạn DNA hoặc RNA bổ sung cho một trình tự quan tâm. Nếu trình tự đích có trong mẫu, đầu dò sẽ lai với nó và làm cho nó có thể phát hiện được. Có hai loại đầu dò là đầu dò phóng xạ và không phóng xạ. Do đó, chúng tôi có thể gắn thẻ các đầu dò bằng thẻ phóng xạ hoặc thẻ huỳnh quang.
Đầu dò phóng xạ là gì?
Đầu dò phóng xạ là các đoạn DNA hoặc RNA sợi đơn có gắn thẻ phóng xạ. Đồng vị phóng xạ được sử dụng trong việc chuẩn bị các đầu dò phóng xạ. Đồng vị phóng xạ32P,33P và35S thường được sử dụng trong việc ghi nhãn các đầu dò. Hơn nữa, các đồng vị phóng xạ3H và1251 cũng được sử dụng ở mức độ thấp hơn trong việc ghi nhãn cho các đầu dò. Nhưng chúng được sử dụng cho các ứng dụng cụ thể. Trong số các đồng vị phóng xạ khác nhau,32P là đồng vị được sử dụng phổ biến nhất trong việc dán nhãn các đầu dò phóng xạ.
Đầu dò phóng xạ cung cấp độ tin cậy và độ đặc hiệu cao hơn. Do đó, chúng cung cấp độ nhạy tối đa và cho phép định lượng chính xác các trình tự mục tiêu. Tuy nhiên, có một số nhược điểm liên quan đến các đầu dò phóng xạ. Chúng có chu kỳ bán rã ngắn. Hơn nữa, chúng rất nguy hiểm và quá trình sản xuất, sử dụng và thải bỏ có vấn đề khi xử lý. Ngoài ra, việc chuẩn bị đầu dò phóng xạ là một quá trình tốn kém. Do đó, do vấn đề an toàn và chi phí, ngày nay các đầu dò phóng xạ không được sử dụng làm đầu dò không phóng xạ.
Đầu dò không hoạt động là gì?
Đầu dò không hoạt tính là loại đầu dò thứ hai được dán nhãn hóa học. Digoxigenin là một thăm dò không hoạt tính, là một chất đánh dấu dựa trên kháng thể. Đầu dò Digoxigenin đặc hiệu và nhạy. Biotin là một nhãn khác được sử dụng trong việc chuẩn bị đầu dò không hoạt tính. Hệ thống phát hiện Biotin / Streptavidin và Digoxigenin / Kháng thể là những đầu dò không hoạt tính phổ biến nhất được sử dụng trong quá trình lai. Hơn nữa, hệ thống peroxidase của cây cải ngựa là một hệ thống thăm dò không hoạt tính khác. Một khi các đầu dò không hoạt tính này được lai với các trình tự đích, chúng có thể được phát hiện thông qua chụp tự động hoặc các kỹ thuật hình ảnh khác.
Hình 01: Lai ghép với Đầu dò không hoạt động
Đầu dò không phóng xạ được sử dụng thường xuyên hơn trong lai axit nucleic hơn là đầu dò phóng xạ. Điều này là do các đầu dò không hoạt tính không liên quan đến các vật liệu nguy hiểm. Hơn nữa, các phương pháp phát hiện không phóng xạ đòi hỏi thời gian tiếp xúc ngắn hơn để phát hiện tín hiệu lai ghép. Tuy nhiên, các bước liên quan đến lai DNA với các đầu dò không hoạt tính thường tẻ nhạt và tốn thời gian. Hơn nữa, các giải pháp có sẵn trên thị trường rất đắt tiền.
Điểm giống nhau giữa các đầu dò phóng xạ và không phóng xạ là gì?
- Đầu dò phóng xạ và không phóng xạ là hai loại đầu dò được sử dụng trong quá trình lai axit nucleic.
- Chúng tạo điều kiện thuận lợi cho việc phát hiện các chuỗi mục tiêu trong mẫu.
- Cả hai loại đầu dò đều nhạy và đặc hiệu như nhau.
Sự khác biệt giữa các đầu dò phóng xạ và không phóng xạ là gì?
Đầu dò phóng xạ là trình tự DNA hoặc RNA sợi đơn được đánh dấu bằng đồng vị phóng xạ, trong khi đầu dò không phóng xạ là trình tự DNA hoặc RNA sợi đơn được đánh dấu bằng thẻ hóa học. Vì vậy, đây là sự khác biệt chính giữa các đầu dò phóng xạ và không phóng xạ. Ngoài ra, các đồng vị phóng xạ rất nguy hiểm. Do đó, các đầu dò phóng xạ rất nguy hiểm, trong khi các đầu dò không phóng xạ không nguy hiểm.
Hơn nữa, một sự khác biệt khác giữa các đầu dò phóng xạ và không phóng xạ là nhược điểm của chúng. Thời gian bán hủy ngắn và các nguy cơ liên quan đến việc sản xuất, sử dụng và thải bỏ chúng là những nhược điểm của việc sử dụng các đầu dò phóng xạ. Mặt khác, các bước liên quan đến lai DNA với các đầu dò không hoạt tính thường tẻ nhạt và tốn thời gian.
Đồ họa thông tin dưới đây cho thấy nhiều so sánh hơn liên quan đến sự khác biệt giữa các đầu dò phóng xạ và không phóng xạ.
Tóm tắt - Đầu dò phóng xạ và không phóng xạ
Một mẫu dò là một đoạn DNA hoặc RNA có chứa trình tự nucleotide bổ sung cho trình tự quan tâm. Để phát hiện trình tự đích, các đầu dò có thể được dán nhãn phóng xạ, huỳnh quang hoặc hóa học. Các đầu dò liên kết với các trình tự bổ sung trong mẫu. Các đầu dò phóng xạ được dán nhãn đồng vị phóng xạ trong khi các đầu dò không phóng xạ được dán nhãn biotin, digoxigenin hoặc peroxidase cải ngựa. Do đó, đây là sự khác biệt chính giữa các đầu dò phóng xạ và không phóng xạ.
