Sự khác biệt chính - Lai ghép tại chỗ với hóa mô miễn dịch
Chẩn đoán ung thư và bệnh truyền nhiễm là một xu hướng phổ biến nơi các kỹ thuật dựa trên bộ gen và protein mới được sử dụng cho mục đích xác định các khối u hoặc tế bào lây nhiễm, sự tăng sinh của nó và các vị trí phát triển tế bào và phân tích cơ sở di truyền của hầu hết các bệnh lây nhiễm và bệnh không lây nhiễm. Điều này sẽ dẫn đến việc chế biến và thiết kế thuốc chính xác và phát triển các liệu pháp tùy chỉnh cho các bệnh. Lai tại chỗ (ISH) và Hóa mô miễn dịch (IHC) là hai kỹ thuật được sử dụng rộng rãi trong sinh học ung thư và sự khác biệt chính giữa lai tại chỗ và hóa miễn dịch nằm ở các phân tử được sử dụng trong quy trình phân tích. Trong ISH, các đầu dò axit nucleic được sử dụng trong phân tích trong khi trong IHC, các kháng thể đơn dòng và đa dòng được sử dụng để xác định chẩn đoán.
Kết hợp In Situ (ISH) là gì?
Lai tại chỗ là kỹ thuật lai axit nucleic được thực hiện trực tiếp trên một phần hoặc một phần của mô, trong toàn bộ mô hoặc trong tế bào. Kỹ thuật này phụ thuộc vào lý thuyết về sự kết cặp cơ sở bổ sung của Watson Crick, tạo ra các phép lai DNA-DNA hoặc DNA-RNA lai có thể phát hiện các gen đột biến hoặc xác định gen quan tâm cần thiết. Trình tự DNA sợi đơn, trình tự DNA sợi kép, trình tự RNA sợi đơn hoặc trình tự oligonucleotide tổng hợp được sử dụng làm đầu dò trong kỹ thuật lai và các đầu dò này được đánh dấu bằng một phốt pho phóng xạ ở đầu 5 'của nó cho các quy trình nhận dạng khi đo tự động hoặc được đánh dấu bằng cách sử dụng thuốc nhuộm huỳnh quang. Có nhiều loại kỹ thuật ISH khác nhau dựa trên loại đầu dò được sử dụng và loại kỹ thuật trực quan hóa theo sau.
Hình 01: Lai ghép huỳnh quang tại chỗ
Có rất nhiều ứng dụng của ISH, chủ yếu trong chẩn đoán phân tử các bệnh truyền nhiễm để xác định sự hiện diện của mầm bệnh và xác nhận mầm bệnh thông qua chẩn đoán phân tử. Nó cũng được sử dụng trong các lĩnh vực sinh học phát triển, karyotyping và phân tích phát sinh loài và lập bản đồ vật lý của nhiễm sắc thể.
Hóa mô miễn dịch (IHC) là gì?
Trong kỹ thuật IHC, phân tử chính được phân tích là kháng nguyên. Trong IHC, các kháng thể đơn dòng và đa dòng được sử dụng để xác định sự hiện diện của kháng nguyên khi nhiễm trùng hoặc tình trạng tăng sinh tế bào ác tính. Kỹ thuật này dựa trên liên kết kháng nguyên-kháng thể và các nhãn enzyme được sử dụng cho kỹ thuật này; một ứng dụng như vậy là ELISA (xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với enzym). Các chất đánh dấu cũng có thể là các kháng thể được gắn thẻ huỳnh quang hoặc các kháng thể được đánh dấu vô tuyến.
Hình 02: Hóa mô miễn dịch
IHC được sử dụng rộng rãi để phát hiện tế bào ung thư. Các quy trình chẩn đoán nhắm vào các kháng nguyên hiện diện trên tế bào khối u để xác định và mô tả đặc điểm của khối u. Quy trình tương tự cũng được kết hợp để chẩn đoán các tác nhân lây nhiễm. Các kháng thể đơn dòng và đa dòng cũng được sử dụng để phân tích các sản phẩm gen khác nhau bằng cách cho phép phản ứng liên kết kháng thể-kháng nguyên giữa protein mong muốn và kháng thể tổng hợp được sử dụng.
Sự tương đồng giữa Lai ghép tại chỗ và Hóa mô miễn dịch là gì?
- ISH và IHC là các phản ứng đặc hiệu cao.
- Cả hai kỹ thuật đều có độ chính xác cao.
- Cả hai kỹ thuật này đều có thể được sử dụng trong chẩn đoán ung thư và các bệnh truyền nhiễm.
- Những kỹ thuật này được thực hiện trong môi trường vô trùng trong ống nghiệm.
- Cả hai đều là những kỹ thuật nhanh chóng mang lại kết quả có thể tái tạo được.
- ISH và IHC sử dụng các phương pháp phát hiện như dán nhãn vô tuyến và kỹ thuật huỳnh quang.
Sự khác biệt giữa Lai ghép tại chỗ và Hóa mô miễn dịch là gì?
Kết hợp tại chỗ với Hóa mô miễn dịch |
|
| ISH là kỹ thuật lai axit nucleic được thực hiện trực tiếp trên một phần hoặc một phần mô hoặc toàn bộ mô. | IHC là một kỹ thuật trong đó các kháng thể đơn dòng và đa dòng được sử dụng để xác định sự hiện diện của kháng nguyên, là các dấu hiệu protein đặc biệt được đặt trên bề mặt tế bào. |
| Loại Phân tử Sinh học được Phân tích | |
| ISH phân tích axit nucleic. | IHC phân tích protein-kháng nguyên. |
| Cơ sở của phản ứng sinh hóa | |
| Sự bắt cặp bazơ bổ sung giữa DNA-DNA hoặc DNA-RNA xảy ra trong kỹ thuật này. | Tương tác kháng nguyên-kháng thể liên quan đến hóa mô miễn dịch. |
| Phương pháp phát hiện liên kết với enzyme | |
| Không thể sử dụng các phương pháp phát hiện liên kết enzyme trong ISH. | Các phương pháp phát hiện liên kết enzyme có thể được sử dụng trong IHC. |
Tóm tắt - Lai ghép In Situ vs Hóa mô miễn dịch
Chẩn đoán phân tử là phương pháp xác nhận và nhanh chóng có thể được sử dụng để xác định một bệnh không lây nhiễm như ung thư hoặc bệnh truyền nhiễm như HIV hoặc Lao dựa trên các dấu hiệu phân tử có trên các tế bào dẫn đến biểu hiện của bệnh. Các dấu hiệu phân tử có thể tồn tại ở dạng protein biểu hiện hoặc ở mức độ di truyền, dựa vào đó các kỹ thuật mới khác nhau được đưa vào để tăng hiệu quả và ít tốn công hơn, mặc dù có chi phí cao liên quan đến các kỹ thuật này. Do đó ISH phụ thuộc vào sự hình thành lai giữa DNA-DNA hoặc DNA-RNA, và IHC phụ thuộc vào các phản ứng cụ thể giữa kháng thể và kháng nguyên. Đây là sự khác biệt giữa kết hợp tại chỗ.
Tải xuống Phiên bản PDF của Lai ghép tại chỗ với Hóa mô miễn dịch
Bạn có thể tải xuống phiên bản PDF của bài viết này và sử dụng nó cho mục đích ngoại tuyến theo ghi chú trích dẫn. Vui lòng tải xuống phiên bản PDF tại đây Sự khác biệt giữa Lai ghép tại chỗ và Hóa mô miễn dịch.
