Sự khác biệt chính giữa sắc ký ái lực và sắc ký trao đổi ion là chúng ta có thể sử dụng sắc ký ái lực để tách các thành phần tích điện hoặc không tích điện trong một hỗn hợp trong khi chúng ta có thể sử dụng sắc ký trao đổi ion để tách các thành phần tích điện trong một hỗn hợp.
Sắc ký là một kỹ thuật mà chúng ta có thể sử dụng để tách các thành phần mong muốn trong một hỗn hợp. Có nhiều loại khác nhau như sắc ký lỏng, sắc ký khí,… Sắc ký ái lực và sắc ký trao đổi ion là hai tiểu thể loại của sắc ký lỏng. Ngoài ra, trong các kỹ thuật này, có hai giai đoạn. Cụ thể, chúng là pha tĩnh và pha động. Mục đích của các kỹ thuật này là tách các thành phần, tùy thuộc vào sự liên kết của các thành phần, trong pha động trên bề mặt của pha tĩnh.
Sắc ký chung sở thích là gì?
Sắc ký ái lực là một kỹ thuật sinh hóa mà chúng tôi sử dụng để tách các thành phần trong một hỗn hợp tùy thuộc vào sự tương tác giữa các thành phần này.
Các tương tác mà chúng tôi sử dụng trong trường hợp này bao gồm những điều sau:
- Tương tác kháng nguyên-kháng thể
- Tương tác giữa enzyme và chất nền
- Tương tác thụ thể-phối tử
- Tương tác giữa protein-axit nucleic
Trong kỹ thuật này, chúng tôi sử dụng các đặc tính phân tử của phân tử cho kỹ thuật tách này. Ở đây, chúng tôi cho phép hợp chất mong muốn tương tác với pha tĩnh thông qua liên kết hydro, tương tác ion, cầu nối disulfua, tương tác kỵ nước, v.v. Các phân tử không tương tác với pha tĩnh sẽ rửa giải trước. Như vậy, chúng ta có thể tách nó ra khỏi hỗn hợp. Hợp chất mong muốn sẽ vẫn được gắn vào pha tĩnh. Do đó, chúng tôi có thể tách nó ra bằng cách sử dụng dung môi rửa giải và làm cho nó rửa giải để tách nó ra.
Hình 01: Một Cột Sắc ký
Sắc ký ái lực hữu ích trong việc tinh chế và cô đặc một chất từ hỗn hợp sử dụng dung dịch đệm. Ngoài ra, nó rất hữu ích trong việc giảm các chất không mong muốn trong hỗn hợp. Khi xem xét thiết bị mà chúng ta sử dụng cho quá trình này, chúng ta nên sử dụng một cột chứa đầy pha tĩnh của chúng ta. Sau đó, chúng ta nên tải pha động chứa các phân tử sinh học mà chúng ta sẽ tách ra. Tiếp theo, cho phép chúng liên kết với pha tĩnh. Sau đó, sử dụng đệm rửa, chúng ta có thể tách các phân tử sinh học không đích, nhưng các phân tử đích phải có ái lực cao với pha tĩnh để quá trình tách thành công.
Sắc ký trao đổi ion là gì?
Sắc ký ion là một dạng sắc ký lỏng, trong đó chúng ta có thể phân tích các chất dạng ion. Thông thường, chúng tôi sử dụng nó để phân tích các anion và cation vô cơ (tức là anion clorua và nitrat và các cation kali, natri). Mặc dù nó ít phổ biến hơn, chúng ta cũng có thể phân tích các ion hữu cơ. Hơn nữa, chúng ta có thể sử dụng kỹ thuật này để tinh chế protein vì protein là các phân tử tích điện ở các giá trị pH nhất định. Ở đây, chúng tôi sử dụng một pha tĩnh rắn mà các hạt tích điện có thể gắn vào. Ví dụ: chúng ta có thể sử dụng chất đồng trùng hợp nhựa polystyrene-divinylbenzene làm giá đỡ vững chắc.
Hình 02: Các giai đoạn của sắc ký trao đổi ion
Để giải thích thêm điều này, pha tĩnh có các ion cố định như anion sunfat hoặc cation amin bậc bốn. Mỗi thứ này nên liên kết với một phản điện tử (một ion có điện tích trái dấu), nếu chúng ta muốn duy trì tính trung lập của hệ thống này. Ở đây, nếu phản tố là một cation, thì chúng tôi đặt tên hệ thống là nhựa trao đổi cation. Nhưng, nếu phản tử là anion, thì hệ thống là nhựa trao đổi anion.
Có năm giai đoạn chính trong quá trình trao đổi ion;
- Giai đoạn đầu
- Hấp phụ của mục tiêu
- Bắt đầu rửa giải
- Kết thúc rửa giải
- Tái sinh
Sự khác biệt giữa sắc ký ái lực và trao đổi ion là gì?
Sắc ký ái lực là một kỹ thuật sinh hóa mà chúng ta sử dụng để tách các thành phần trong một hỗn hợp tùy thuộc vào sự tương tác giữa các thành phần này trong khi sắc ký ion là một dạng sắc ký lỏng, trong đó chúng ta có thể phân tích các chất ion. Vì vậy, sự khác biệt chính giữa sắc ký ái lực và sắc ký trao đổi ion là chúng ta có thể sử dụng sắc ký trao đổi ion chỉ để tách các chất ion trong khi sắc ký ái lực có khả năng tách cả các hạt tích điện và không tích điện. Khi xem xét nguyên lý làm việc, sự khác biệt giữa sắc ký ái lực và sắc ký trao đổi ion là sắc ký ái lực tiến hành do thực tế là các phân tử đích có ái lực cao với pha tĩnh. Tuy nhiên, đối với sắc ký trao đổi ion, các phân tử đích có điện tích trái dấu với điện tích của bề mặt pha tĩnh.
Đồ họa thông tin dưới đây trình bày sự khác biệt giữa sắc ký ái lực và sắc ký trao đổi ion dưới dạng so sánh song song.
Tóm tắt - Sắc ký trao đổi ái lực vs Ion
Tóm lại, sắc ký ái lực và sắc ký trao đổi ion là hai dạng của kỹ thuật sắc ký lỏng. Sự khác biệt chính giữa sắc ký ái lực và sắc ký trao đổi ion là chúng ta có thể sử dụng sắc ký ái lực để tách các thành phần tích điện hoặc không tích điện trong một hỗn hợp trong khi chúng ta có thể sử dụng sắc ký trao đổi ion để tách các thành phần tích điện trong một hỗn hợp.
