Sự khác biệt chính giữa sắc ký trao đổi ion và sắc ký loại trừ kích thước là sắc ký trao đổi ion được sử dụng để phân tích các chất ion theo điện tích trong khi sắc ký loại trừ kích thước được sử dụng để phân tích các phân tử lớn theo kích thước.
Sắc ký là một kỹ thuật phân tích có thể được sử dụng để phân tích các hỗn hợp khác nhau. Các kỹ thuật sắc ký được đặt tên theo thông số được sử dụng để phân tích các chất - ví dụ: sắc ký loại trừ kích thước, sắc ký trao đổi ion, v.v.
Sắc ký trao đổi ion là gì?
Sắc ký trao đổi ion là một kỹ thuật phân tích trong đó chúng ta có thể phân tích các chất dạng ion. Nó thường hữu ích để phân tích các anion và cation vô cơ (tức là anion clorua và nitrat và các cation kali, natri). Mặc dù nó không phải là một phương pháp quá phổ biến nhưng chúng ta có thể phân tích các ion hữu cơ bằng cách sử dụng nó. Hơn nữa, chúng ta có thể sử dụng kỹ thuật này để tinh chế protein vì protein là các phân tử tích điện ở các giá trị pH nhất định. Ở đây, chúng tôi sử dụng một pha tĩnh rắn mà các hạt tích điện có thể gắn vào. Ví dụ: chúng ta có thể sử dụng chất đồng trùng hợp nhựa polystyrene-divinylbenzene làm giá đỡ vững chắc.
Hình 01: Lý thuyết đằng sau Sắc ký Trao đổi Ion
Để giải thích thêm điều này, pha tĩnh có các ion cố định như anion sunfat hoặc cation amin bậc bốn. Mỗi loại trong số này phải liên kết với một ion ngược dấu (một ion có điện tích trái dấu) nếu chúng ta muốn duy trì tính trung lập của hệ thống này. Nếu ion đối tính là một cation, thì chúng ta đặt tên hệ thống là nhựa trao đổi cation. Nhưng, nếu phản tử là anion, thì hệ thống là nhựa trao đổi anion. Hơn nữa, có năm bước chính trong sắc ký trao đổi ion:
- Giai đoạn đầu
- Hấp phụ của mục tiêu
- Bắt đầu rửa giải
- Kết thúc rửa giải
- Tái sinh
Sắc ký loại trừ kích thước là gì?
Sắc ký loại trừ kích thước hoặc SEC là một kỹ thuật phân tích trong đó các phân tử trong hỗn hợp có thể được phân tách theo kích thước và trọng lượng phân tử của chúng. Thông thường, nó hoạt động với các phân tử lớn được gọi là đại phân tử. Thông thường, dung dịch nước được sử dụng để phân tích. Sau đó, nó được gọi là sắc ký lọc gel. Khi một dung môi hữu cơ, nó được gọi là sắc ký thẩm thấu gel.
Sắc ký lọc gel là một dạng sắc ký loại trừ kích thước, trong đó chúng tôi sử dụng dung dịch nước làm pha động. Do đó, pha động mà chúng ta thường sử dụng trong kỹ thuật này là chất đệm dung dịch nước. Ngoài ra, chúng tôi sử dụng một cột sắc ký cho sự phân tách này và chúng tôi cần bao gói cột bằng các hạt xốp. Thông thường, Sephadex và agarose hữu ích làm vật liệu xốp. Do đó, những vật liệu này là pha tĩnh trong thí nghiệm của chúng tôi. Hơn nữa, chúng ta có thể sử dụng kích thước lỗ của các hạt này để xác định kích thước của các đại phân tử mà chúng ta đang phân tách. Tuy nhiên, đó chỉ là ước tính.
Hình 02: Thiết bị Sắc ký Loại trừ Kích thước
Sắc ký thẩm thấu gel là một dạng sắc ký loại trừ kích thước, trong đó chúng tôi sử dụng dung môi hữu cơ làm pha động. Do đó, chúng ta có thể sử dụng các dung dịch như hexan và toluen cho mục đích này. Pha tĩnh là một vật liệu xốp, giống như trong sắc ký lọc gel. Kỹ thuật này thường được áp dụng cho polyme và các vật liệu hòa tan hữu cơ khác. Phương pháp hoạt động của kỹ thuật tương tự như phương pháp của sắc ký lọc gel.
Sự khác biệt giữa sắc ký trao đổi ion và sắc ký loại trừ kích thước là gì?
Sắc ký là một kỹ thuật phân tích có thể được sử dụng để phân tích các hỗn hợp khác nhau. Sự khác biệt chính giữa sắc ký trao đổi ion và sắc ký loại trừ kích thước là sắc ký trao đổi ion được sử dụng để phân tích các chất ion theo điện tích trong khi sắc ký loại trừ kích thước được sử dụng để phân tích các phân tử lớn theo kích thước.
Infographic dưới đây cung cấp thêm thông tin về sự khác biệt giữa sắc ký loại trừ kích thước và trao đổi ion.
Tóm tắt - Sắc ký trao đổi ion và loại trừ kích thước
Sắc ký là một kỹ thuật phân tích có thể được sử dụng để phân tích các hỗn hợp khác nhau. Sự khác biệt chính giữa sắc ký trao đổi ion và sắc ký loại trừ kích thước là sắc ký trao đổi ion được sử dụng để phân tích các chất ion theo điện tích trong khi sắc ký loại trừ kích thước được sử dụng để phân tích các phân tử lớn theo kích thước.
