Sự khác biệt chính giữa Elisa và Elispot là Elisa là một xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với enzym để xác định tổng nồng độ của các protein tín hiệu được tiết ra, trong khi Elispot là xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với enzym để phát hiện các tế bào tiết cytokine riêng lẻ.
Elisa và Elispot là hai xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với enzym được sử dụng rộng rãi trong y học, bệnh học thực vật, công nghệ sinh học và các ngành công nghiệp dược phẩm khác nhau. Trong các kỹ thuật này, một chất phân tích protein được phát hiện bởi một kháng thể chống lại nó. Elisa là xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với enzym phổ biến nhất được sử dụng trong các phòng thí nghiệm. Mặt khác, Elispot là một xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với enzym không được sử dụng thay thế cho Elisa mà được sử dụng bổ sung cho Elisa trong các phòng thí nghiệm.
Thử nghiệm Elisa là gì?
Elisa là một xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với enzym để xác định tổng nồng độ của các protein tín hiệu được tiết ra. Đây là một xét nghiệm hóa sinh phân tích được sử dụng rộng rãi lần đầu tiên được mô tả bởi Engvall và Perlmann vào năm 1971. Kỹ thuật này sử dụng một loại xét nghiệm miễn dịch enzym pha rắn để phát hiện sự hiện diện của một protein cụ thể trong một mẫu lỏng bằng cách sử dụng các kháng thể chống lại protein cụ thể này. Xét nghiệm này là một công cụ chẩn đoán thường được sử dụng trong y học, bệnh học thực vật và công nghệ sinh học.
Cơ chế của Kiểm tra ELISA
Trong hầu hết các thử nghiệm ELISA, một lượng kháng nguyên không xác định được cố định trên một giá đỡ vững chắc (tấm microlit) lúc đầu. Sau đó, kháng thể chính phù hợp được áp dụng trên bề mặt hỗ trợ rắn. Kháng thể này tạo phức hợp với kháng nguyên (phức hợp kháng nguyên-kháng thể). Kháng thể sơ cấp liên kết với kháng nguyên có thể được phát hiện bởi kháng thể thứ cấp được liên kết với một enzym thông qua liên hợp sinh học. Trong bước cuối cùng của thử nghiệm Elisa, một chất có chứa cơ chất của enzym được thêm vào. Nếu có sự gắn kết thích hợp của một kháng thể chính với kháng nguyên, thì chất nền sẽ tạo ra sự thay đổi màu sắc có thể phát hiện được. Cuối cùng, điều này định lượng kháng nguyên trong mẫu.
Hình 01: Các loại Elisa khác nhau
Hơn nữa, có nhiều cách tiếp cận khác nhau đối với Elisa, chẳng hạn như Elisa trực tiếp và Elisa gián tiếp. Hiện nay, các xét nghiệm Elisa khác nhau được sử dụng để phát hiện các mầm bệnh ở người như Mycobacterium tuberculosis, virus rota, virus viêm gan B, virus viêm gan C, độc tố ruột sinh ra E.coli, HIV và SARS-CoV-2.
Thử nghiệm Elispot là gì?
Elispot là một xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với enzym để phát hiện các tế bào tiết cytokine riêng lẻ. Cecil Czerkinsky lần đầu tiên mô tả ELISpot vào năm 1983. Đây là một loại xét nghiệm tập trung vào việc đo định lượng tần số tiết cytokine cho một tế bào. Nó cũng được phân loại là một kỹ thuật sử dụng kháng thể để phát hiện chất phân tích protein sinh học hoặc hóa học. Xét nghiệm Fluorospot là một biến thể của xét nghiệm Elispot, sử dụng huỳnh quang để phân tích nhiều chất phân tích (nhiều protein tiết hơn).
Cơ chế của Thử nghiệm Elispot
Trong cơ chế này, ban đầu các kháng thể đơn dòng đặc hiệu cytokine được thêm vào các giếng của đĩa microlit. Sau đó, các tế bào mong muốn đang được quan sát được thêm vào các giếng. Sau đó, các tế bào được ủ. Trong quá trình ủ tế bào, các tế bào được phép phản ứng với bất kỳ kích thích nào và tiết ra cytokine. Các cytokine đã được tiết ra bởi các tế bào được ủ sẽ gắn vào các kháng thể vì các tế bào được bao quanh bởi các kháng thể đơn dòng đặc hiệu cytokine.
Hình 02: Thử nghiệm Elispot
Để phát hiện các kháng thể đơn dòng đặc hiệu cytokine này, các kháng thể phát hiện đặc hiệu được đánh dấu biotin được thêm vào giếng. Các kháng thể phát hiện đặc hiệu được đánh dấu biotin bắt giữ các kháng thể đơn dòng đặc hiệu cytokine trong các giếng. Hơn nữa, các liên hợp streptavidin-enzym được thêm vào giếng để liên kết với các kháng thể phát hiện. Trong bước cuối cùng, các chất nền cụ thể được thêm vào giếng. Các phản ứng của sự liên hợp enzyme và cơ chất tạo ra các điểm khác biệt trong giếng. Những điểm riêng biệt này được đọc trên đầu đọc ELISpot tự động. Cuối cùng, điều này sẽ tính toán thêm tần suất tiết cytokine.
Điểm giống nhau giữa Elisa và Elispot là gì?
- Cả hai đều là xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với enzym.
- Cả hai xét nghiệm đều phát hiện các chất phân tích protein cụ thể.
- Những xét nghiệm này sử dụng các kháng thể cụ thể để xác định các chất phân tích protein.
- Cả hai xét nghiệm đều sử dụng enzym và chất nền.
- Chúng được sử dụng như một công cụ chẩn đoán trong các phòng thí nghiệm y tế.
Sự khác biệt giữa Elisa và Elispot là gì?
Elisa là một xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với enzym để xác định tổng nồng độ của các protein tín hiệu được tiết ra. Mặt khác, Elispot là một xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với enzym để đo các tế bào tiết cytokine riêng lẻ. Vì vậy, đây là điểm khác biệt chính giữa Elisa và Elispot. Hơn nữa, trong thử nghiệm Elisa, trước tiên kháng nguyên được cố định trên các giếng microlit. Ngược lại, trong thử nghiệm Elispot, trước tiên kháng thể được cố định trên các giếng microlit. Vì vậy, đây là một điểm khác biệt giữa Elisa và Elispot.
Đồ họa thông tin dưới đây trình bày phân tích chi tiết về sự khác biệt giữa Elisa và Elispot ở dạng bảng.
Tóm tắt - Elisa vs Elispot
Elisa và Elispot là hai xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với enzym được sử dụng rộng rãi trong y học, bệnh học thực vật, công nghệ sinh học và các ngành dược phẩm khác nhau. Elisa phát hiện sự hiện diện của phối tử (protein) trong mẫu chất lỏng bằng cách sử dụng các kháng thể chống lại phối tử cần đo. Xét nghiệm Elispot là một phương pháp được sử dụng rộng rãi để theo dõi các phản ứng miễn dịch. Nó phát hiện các tế bào tiết cytokine riêng lẻ bằng cách sử dụng các kháng thể. Nó vừa là kỹ thuật xét nghiệm miễn dịch vừa là kỹ thuật xét nghiệm sinh học. Vì vậy, đây là tóm tắt về sự khác biệt giữa Elisa và Elispot.
