Sự khác biệt chính giữa xét nghiệm BCA và Bradford là xét nghiệm BCA tốn thời gian và kém chính xác hơn, trong khi xét nghiệm Bradford nhanh chóng và chính xác.
BCA và Bradford assay là hai phương pháp xét nghiệm xác định nồng độ protein. Hai xét nghiệm này có các nguyên tắc xét nghiệm khác nhau và độ chính xác của chúng cũng khác nhau.
Thử nghiệm BCA là gì?
Xét nghiệmBCA hoặc xét nghiệm axit bicinchoninic là một xét nghiệm sinh hóa hữu ích trong việc xác định tổng nồng độ của protein trong dung dịch. Phương pháp này cũng được đặt tên là thử nghiệm Smith theo tên người phát minh ra nó, Paul K. Smith. Phương pháp phân tích này cho thấy những điểm tương đồng với xét nghiệm protein Lowry, xét nghiệm protein Bradford hoặc thuốc thử biuret. Chúng ta có thể quan sát tổng nồng độ protein trong một mẫu nhất định thông qua sự thay đổi màu sắc của dung dịch mẫu, từ màu xanh lá cây sang màu tím. Sự thay đổi màu sắc này xảy ra tương ứng với hàm lượng protein. Sau đó, chúng tôi có thể sử dụng kỹ thuật đo màu để phân tích cường độ màu và hàm lượng protein trong mẫu.
Phương pháp Ước tính Protein BCA
Khi xem xét cơ chế của xét nghiệm BCA, dung dịch BCA điển hình chứa dung dịch có tính kiềm cao với độ pH gần 11,25 và các thành phần trong dung dịch này bao gồm axit bicinchoninic, natri cacbonat, natri bicacbonat, natri tartrat, và đồng (II) sunfat pentahiđrat. Thử nghiệm này chủ yếu phụ thuộc vào hai phản ứng hóa học: sự khử đồng (II) thành đồng (I) bằng các liên kết peptit trong protein và sự che lấp hai phân tử axit bicinchoninic bằng ion đồng (I), tạo ra phức màu tím có thể hấp thụ ánh sáng ở bước sóng 562 nm. Trong phản ứng đầu tiên, lượng đồng (II) bị khử bởi các liên kết peptit tỷ lệ với lượng protein trong mẫu.
Thử nghiệm Bradford là gì?
Bradford assay là một phương pháp phân tích quang phổ hữu ích trong việc đo nồng độ của protein trong dung dịch. Phương pháp này được phát triển bởi Marion M. Bradford vào năm 1976, và nó là một phương pháp tương đối nhanh và chính xác.
Phản ứng màu của Protein và Thuốc thử Bradford
Chúng ta có thể sử dụng phương pháp này để xác định nồng độ của lượng protein trong mẫu. Phản ứng hóa học diễn ra trong mẫu trong quá trình thử nghiệm này hoàn toàn phụ thuộc vào thành phần axit amin của protein trong mẫu.
Phương pháp Ước tính Protein của Bradford
Khi xem xét phương pháp của xét nghiệm này, đó là xét nghiệm protein đo màu dựa trên sự thay đổi độ hấp thụ của thuốc nhuộm có tên Coomassie Brilliant Blue G-250. Nói chung, thuốc nhuộm này tồn tại ở ba dạng là dạng anion (xanh lam), dạng trung tính (xanh lá cây) và dạng cation (đỏ). Do đó, trong điều kiện axit, thuốc nhuộm chuyển màu từ đỏ sang xanh lam. Điều này là do liên kết của protein với thuốc nhuộm. Ngược lại, nếu không có protein để liên kết với thuốc nhuộm, sự thay đổi màu không xuất hiện, dung dịch có màu nâu đỏ. Thuốc nhuộm này có khả năng tạo phức không cộng hóa trị mạnh với nhóm cacboxyl của protein thông qua lực Van der Waal và lực hút tĩnh điện.
Sự khác biệt giữa BCA và Bradford Assay là gì?
BCA và Bradford assay là hai phương pháp xét nghiệm xác định nồng độ protein. Hai xét nghiệm này có các nguyên tắc xét nghiệm khác nhau và khác nhau về độ chính xác của chúng. Sự khác biệt chính giữa xét nghiệm BCA và Bradford là xét nghiệm BCA tốn thời gian và kém chính xác hơn, trong khi xét nghiệm Bradford nhanh chóng và chính xác.
Infographic sau đây tóm tắt sự khác biệt giữa xét nghiệm BCA và Bradford ở dạng bảng.
Tóm tắt - Thử nghiệm BCA vs Bradford
Xét nghiệmBCA hoặc xét nghiệm axit bicinchoninic là một xét nghiệm sinh hóa hữu ích trong việc xác định tổng nồng độ của protein trong dung dịch. Xét nghiệm Bradford là một phương pháp phân tích quang phổ hữu ích trong việc đo nồng độ của protein trong dung dịch. Sự khác biệt chính giữa xét nghiệm BCA và Bradford là BCA tốn thời gian và kém chính xác hơn, trong khi xét nghiệm Bradford nhanh chóng và chính xác.
