Sự khác biệt chính giữa xét nghiệm protein bradford và lowry là xét nghiệm protein Bradford dựa trên sự thay đổi độ hấp thụ của thuốc nhuộm Coomassie màu xanh lam rực rỡ G-250 trong khi xét nghiệm protein Lowry dựa trên phản ứng của các ion đồng (Cu +) được tạo ra bởi quá trình oxy hóa các liên kết peptit bằng thuốc thử Folin – Cioc alteu.
Thử nghiệm là một kỹ thuật phân tích giúp xác định đặc điểm của các thành phần chức năng chính của mẫu. Do đó, một thử nghiệm có thể là một thử nghiệm định tính hoặc định lượng. Nhiều lĩnh vực bao gồm y học phòng thí nghiệm, dược học, sinh học môi trường, sinh học phân tử, hóa sinh và miễn dịch học sử dụng loại xét nghiệm này thường xuyên. Xét nghiệm protein Bradford và Lowry là hai xét nghiệm sinh hóa xác định nồng độ protein trong dung dịch mẫu. Cả hai thử nghiệm đều sử dụng kỹ thuật đo màu để cung cấp kết quả.
Xét nghiệm Protein Bradford là gì?
Xét nghiệm protein Bradford là một quy trình phân tích quang phổ nhanh để phân tích protein. Nó cho thấy độ chính xác cao khi đo nồng độ protein trong dung dịch. Marion Bradford đã giới thiệu quy trình này vào năm 1976. Trong thử nghiệm này, tổng phản ứng dựa trên thành phần axit amin của các protein được đo. Nói cách khác, xét nghiệm protein Bradford là một xét nghiệm so màu. Nó sử dụng thuốc nhuộm Coomassie màu xanh lam rực rỡ. Do đó, xét nghiệm protein so màu này phụ thuộc vào sự thay đổi độ hấp thụ của thuốc nhuộm. Coomassie màu xanh lam rực rỡ G-250 tồn tại ở ba định dạng: cation (đỏ), anion (xanh lam) và trung tính (xanh lá cây). Trong điều kiện có tính axit, dạng màu đỏ của thuốc nhuộm chuyển thành màu xanh lam. Nó xác nhận sự liên kết của protein. Nếu không có protein, dung dịch có thể vẫn có màu nâu.
Hình 01: Xét nghiệm protein Bradford
Xét nghiệm protein Bradford khác với các xét nghiệm protein khác vì nó ít bị ảnh hưởng bởi các hợp chất hóa học khác nhau có trong dung dịch protein. Các hợp chất này bao gồm natri, kali, glucose và sucrose, v.v.
Thử nghiệm Protein Lowry là gì?
Xét nghiệm protein thấp là một xét nghiệm sinh hóa được sử dụng để xác định tổng mức protein trong dung dịch. Oliver H. Lowry là người đã phát triển thuốc thử này vào năm 1940. Quy trình mô tả tổng nồng độ protein của dung dịch bằng sự thay đổi màu sắc tỷ lệ với nồng độ protein trong dung dịch. Do đó, đây cũng là một xét nghiệm protein đo màu.
Phản ứng giữa các ion đồng (Cu +) được tạo ra bởi quá trình oxy hóa các liên kết peptit và thuốc thử Folin – Cioc alteu là cơ sở của quy trình này. Ngoài ra, thuốc thử này còn chứa axit phosphomolybdic và axit phosphor-tungstic. Tuy nhiên, cơ chế phản ứng của xét nghiệm Lowry protein vẫn chưa được hiểu rõ. Nhưng nó liên quan đến quá trình oxy hóa dư lượng cysteine, tryptophan và tyrosine bằng cách khử thuốc thử Folin – Cioc alteu.
Hình 02: Xét nghiệm hàm lượng protein thấp
Dư lượng cysteine góp phần vào độ hấp thụ được quan sát thấy trong thử nghiệm protein Lowry và kết quả phản ứng tạo ra phân tử màu xanh lam rực rỡ; màu xanh lam molypden heteropoly. Sự khử của phân tử này được đo bằng độ hấp thụ ở bước sóng 660nm. Do đó, nồng độ của dư lượng cysteine và tryptophan đã làm giảm thuốc thử Folin – Cioc alteu suy ra tổng nồng độ của protein trong dung dịch.
Điểm giống nhau giữa xét nghiệm Bradford và Lowry Protein là gì?
- Xét nghiệm protein Bradford và Lowry xác định nồng độ protein trong dung dịch.
- Cả hai phương pháp đều là phương pháp đo màu.
- Ngoài ra, độ nhạy của cả hai phương pháp đều cao.
Sự khác biệt giữa xét nghiệm Bradford và Lowry Protein là gì?
Xét nghiệm protein Bradford và Lowry là hai loại xét nghiệm xác định nồng độ protein trong dung dịch. Xét nghiệm protein Bradford dựa trên sự thay đổi độ hấp thụ của thuốc nhuộm Coomassie màu xanh lam rực rỡ G-250 trong khi xét nghiệm protein Lowry phụ thuộc vào phản ứng của các ion đồng được tạo ra bởi quá trình oxy hóa các liên kết peptit, với thuốc thử Folin – Cioc alteu. Vì vậy, đây là điểm khác biệt chính giữa xét nghiệm protein Bradford và Lowry. Xét nghiệm protein Bradford mất 15 phút để đưa ra kết quả trong khi xét nghiệm protein Lowery mất 40-60 phút để đưa ra kết quả. Do đó, đây là một điểm khác biệt giữa xét nghiệm protein Bradford và Lowry. Hơn nữa, xét nghiệm protein Bradford phụ thuộc vào thành phần axit amin trong khi xét nghiệm protein Lowry phụ thuộc một phần vào thành phần axit amin. Do đó, đây cũng là sự khác biệt giữa xét nghiệm protein Bradford và Lowry.
Hình dưới đây cung cấp thêm thông tin chi tiết về sự khác biệt giữa xét nghiệm protein Bradford và Lowry.
Tóm tắt - Thử nghiệm Bradford vs Lowry Protein
Thử nghiệm là một kỹ thuật phân tích được sử dụng để xác định đặc điểm của thành phần chức năng chính của mẫu. Xét nghiệm protein Bradford và Lowry là hai loại xét nghiệm protein hoạt động theo kỹ thuật so màu. Cả hai xét nghiệm protein Bradford và Lowry đều xác định nồng độ protein trong dung dịch. Tuy nhiên, sự khác biệt chính giữa Bradford và Lowry Protein Assay nằm ở kỹ thuật đo màu mà họ sử dụng. Xét nghiệm protein Bradford sử dụng màu xanh lam rực rỡ Coomassie G-250 trong khi xét nghiệm protein Lowry sử dụng ion đồng (Cu +) và thuốc thử Folin – Cioc alteu. Hơn nữa, phương pháp Bradford cho kết quả nhanh chóng hơn so với phương pháp Lowry protein. Tuy nhiên, cả hai phương pháp đều là những phương pháp có độ nhạy cao và phải chịu sự can thiệp của nhiều chất khác nhau.
