Sự khác biệt chính giữa BL21 và DH5 Alpha là BL21 là tế bào E. coli có thẩm quyền biến đổi gen bị thiếu protease được sử dụng chủ yếu để biểu hiện protein, trong khi DH5 Alpha là tế bào E. coli có thẩm quyền biến đổi gen với đột biến recA1 được sử dụng chủ yếu để chuyển đổi plasmid.
E. coli là một trong những sinh vật nổi tiếng được lựa chọn để sản xuất protein tái tổ hợp. Nó đã trở thành nền tảng biểu đạt phổ biến nhất trong những năm qua. Nó cũng được sử dụng như một nhà máy sản xuất tế bào. BL21 và DH5 Alpha là hai tế bào E. coli được biến đổi gen hiện đang được sử dụng để biểu hiện protein và biến nạp plasmid, tương ứng.
BL21 là gì?
BL21 là tế bào E.coli có thẩm quyền được biến đổi gen bị thiếu hụt protease chủ yếu được sử dụng để biểu hiện protein. E. coli BL21 là một tế bào vi khuẩn có nguồn gốc từ chủng B. Nó có khuyết tật của Lon protease và protease màng ngoài ompT. Nó thường được sử dụng để biểu hiện protein tái tổ hợp vì nó thường mang lại sự ổn định cho các protein biểu hiện. BL21 hữu ích cho sự biểu hiện protein với pCold I-IV DNA và pCold TF DNA. Nhưng tế bào E. coli có thẩm quyền này không dành cho hệ thống biểu hiện protein sử dụng promoter T7 như hệ thống pET. Lý do đằng sau điều này là BL21 không biểu hiện T7 RNA polymerase. Ngoài ra, nó không được khuyến khích sử dụng để xây dựng hoặc điều chế plasmid vì nó không có đột biến recA.
Hình 01: BL21
BL21 được Studier mô tả lần đầu tiên vào năm 1986 sau nhiều sửa đổi khác nhau của dòng B. Các tế bào BL21 bị thiếu LON protease, chất này phân hủy nhiều protein lạ. Hơn nữa, nó còn thiếu một gen khác mã hóa protease màng ngoài (OmpT) có chức năng phân hủy protein ngoại bào. Việc thiếu các protein này sẽ kích hoạt sản xuất thành công protein ngoại lai trong tế bào E. coli BL21. Hơn nữa, đột biến hsdSB trong các tế bào này ngăn cản sự methyl hóa DNA ngoại lai và sự phá vỡ trong các tế bào BL21.
DH5 Alpha là gì?
DH5 Alpha là tế bào E. coli có thẩm quyền được biến đổi gen với đột biến recA1 được sử dụng chủ yếu để biến nạp plasmid. Tế bào Alpha E. coli DH5 được biến đổi gen bởi nhà sinh vật học người Mỹ Douglas Hanahan để tối đa hóa hiệu quả của quá trình biến nạp. Tế bào DH5 Alpha có ba đột biến riêng biệt: recA1, endA1 và lacZΔM15. recA1 là một đột biến điểm duy nhất thay thế glycine 160 bằng và một gốc axit aspartic trong polypeptit recA. Đột biến này làm vô hiệu hóa hoạt động của các tái tổ hợp và làm bất hoạt sự tái tổ hợp tương đồng. Đột biến endA1 làm bất hoạt endonuclease nội bào, ngăn cản nó phân hủy plasmid được chèn vào.
Hình 02: DH5 Alpha
Hơn nữa, đột biến lacZΔM15 cho phép sàng lọc màu trắng xanh đối với các tế bào đã biến đổi. Những tế bào này là những tế bào có thẩm quyền. Chúng thường được sử dụng với sự biến đổi canxi clorua để chèn plasmid mong muốn. Nghiên cứu gần đây đã xác định được rằng tế bào DH5 Alpha bằng phương pháp Hanahan là tế bào có thẩm quyền hiệu quả nhất để chuyển đổi plasmid.
Điểm giống nhau giữa BL21 và DH5 Alpha là gì?
- BL21 và DH5 Alpha là hai E.coliđược biến đổi gen
- Cả hai đều là những tế bào có thẩm quyền.
- Chúng bao gồm các đột biến riêng biệt.
- Cả hai đều không có môi trường sống tự nhiên.
- Chúng được sử dụng cho các mục đích trong phòng thí nghiệm như nghiên cứu biểu hiện và quy trình nhân bản.
Sự khác biệt giữa BL21 và DH5 Alpha là gì?
BL21 là tế bào E. coli có thẩm quyền được biến đổi gen bị thiếu protease chủ yếu được sử dụng để biểu hiện protein. Mặt khác, DH5 Alpha là tế bào E. coli có thẩm quyền được biến đổi gen với đột biến recA1 chủ yếu được sử dụng để biến nạp plasmid. Vì vậy, đây là điểm khác biệt chính giữa BL21 và DH5 Alpha. Hơn nữa, tế bào E. coli BL21 không có đột biến recA1, trong khi tế bào Alpha E. coli DH5 có đột biến recA1.
Infographic sau liệt kê sự khác biệt giữa BL21 và DH5 Alpha ở dạng bảng.
Tóm tắt - BL21 vs DH5 Alpha
Các chủng vi khuẩn E. coli không gây bệnh được các nhà khoa học phát triển về mặt di truyền cho các nghiên cứu biểu hiện trong phòng thí nghiệm và mục đích nhân bản. BL21 và DH5 Alpha là hai tế bào E.coli được biến đổi gen. BL21 chủ yếu được sử dụng cho các nghiên cứu biểu hiện protein. Mặt khác, DH5 Alpha chủ yếu được sử dụng cho mục đích biến nạp plasmid. Vì vậy, đây là tóm tắt về sự khác biệt giữa BL21 và DH5 Alpha.
