Sự khác biệt chính - Gram Stain vs Culture
Nhuộm Gram là một kỹ thuật nhuộm được thực hiện để phân biệt vi khuẩn thành hai nhóm theo độ dày của lớp peptidoglycan trong thành tế bào của chúng. Nuôi cấy là một phương pháp nuôi cấy và duy trì vi sinh vật trong các điều kiện phòng thí nghiệm để phân tích khác nhau. Sự khác biệt chính giữa nhuộm gram và nuôi cấy là chức năng của chúng; Chủng gram một kỹ thuật nhuộm vi khuẩn trong đó nuôi cấy là một phương pháp nuôi cấy và duy trì vi sinh vật.
Gram Stain là gì?
Nhuộm Gram là một kỹ thuật nhuộm phân biệt quan trọng được sử dụng để xác định vi khuẩn trong Vi sinh. Kỹ thuật này được giới thiệu bởi nhà vi khuẩn học người Đan Mạch Hans Christian Gram vào năm 1884. Phương pháp nhuộm Gram phân loại vi khuẩn thành hai nhóm chính: gram dương và gram âm; những điều này rất quan trọng trong việc phân loại và xác định vi khuẩn. Quá trình nhuộm Gram được thực hiện như một bước ban đầu để xác định đặc tính của vi khuẩn.
Vi khuẩn được phân nhóm dựa trên sự khác biệt trong thành tế bào của chúng. Vi khuẩn Gram dương chứa một lớp peptidoglycan dày trong thành tế bào của chúng trong khi vi khuẩn Gram âm chứa một lớp peptidoglycan mỏng trong thành tế bào của chúng như trong hình 01. Kết quả của việc nhuộm gram sẽ dựa trên sự khác biệt về độ dày của lớp peptidoglycan của thành tế bào.
Hình 1: Vi khuẩn Gram dương và vi khuẩn Gram âm
Gram nhuộm được thực hiện bằng cách sử dụng bốn loại thuốc thử khác nhau, cụ thể là; vết bẩn chính, chất tạo màu, chất khử màu và vết bẩn trên bề mặt. Màu tím pha lê và safranin đóng vai trò là chất tạo màu chính và chống bám bẩn, trong khi gam iốt và cồn 95% đóng vai trò là chất bám màu và khử màu, tương ứng.
Các bước cơ bản của Grams Stain
- Một vết bẩn vi khuẩn được chuẩn bị trên một lam kính sạch, được cố định nhiệt và làm lạnh.
- Smear ngập trong màu tím pha lê trong 1 - 2 phút.
- Smear được xả bằng vòi nước chảy chậm để loại bỏ các vết bẩn dư thừa.
- Gram i-ốt được bôi lên vết bẩn trong 1 phút.
- Smear được rửa sạch bằng nước máy chảy chậm
- Smear được rửa bằng cồn 95% trong 2 - 5 giây và rửa lại bằng vòi nước chảy chậm.
- Smear được nhuộm bằng safranin trong 1 phút
- Smear được rửa sạch bằng nước máy chảy chậm, làm khô và quan sát dưới kính hiển vi.
Khi kết thúc nhuộm gram, vi khuẩn gram âm sẽ được quan sát có màu hồng trong khi vi khuẩn gram dương sẽ được quan sát có màu tím như trong Hình 02. Kết quả của vết gram được quyết định bởi độ dày của lớp peptidoglycan trong thành tế bào của chúng. Trong bước khử màu, vết sơ cấp và chất nhuộm dễ dàng bị loại bỏ khỏi vi khuẩn gram âm và trở nên không màu vì chúng có một lớp peptidoglycan mỏng. Vết chính được giữ lại trong vi khuẩn gram dương vì chúng có một lớp peptidoglycan dày. Vết bẩn trên máy đếm sẽ không có hiệu quả đối với vi khuẩn gram dương do vết bẩn chính vẫn còn lưu lại. Vì vậy, vi khuẩn gram dương sẽ có thể nhìn thấy trong màu nhuộm cơ bản, tức là màu tím. Vết bẩn trên máy đếm sẽ nhuộm màu vi khuẩn gram âm và có thể nhìn thấy màu chọn là màu safranin. Do đó, có thể dễ dàng phân loại vi khuẩn thành hai nhóm bằng cách nhuộm gram và nó có giá trị trong việc phân biệt và xác định vi khuẩn.
Hình 2: Căng Gram
Văn hóa là gì?
Cấy vi sinh là phương pháp nuôi cấy và duy trì vi sinh vật trong điều kiện phòng thí nghiệm với các mục đích khác nhau. Các vi sinh vật được nuôi cấy trong môi trường rắn, nửa rắn và lỏng dựa trên loại và mục đích nuôi cấy của vi sinh vật. Môi trường nuôi cấy được cung cấp các chất dinh dưỡng cần thiết và các điều kiện phát triển theo yêu cầu của vi sinh vật. Môi trường nuôi cấy có các thành phần khác nhau như nguồn năng lượng, nguồn cacbon, nguồn nitơ, khoáng chất, vi chất dinh dưỡng, nước, chất đông đặc, v.v. Nhiệt độ, oxy và pH tối ưu phải được điều chỉnh tùy theo loại vi sinh vật được nuôi trồng.
Có nhiều loại vi sinh vật khác nhau; ví dụ, nuôi cấy theo mẻ, nuôi cấy liên tục, nuôi cấy đâm, nuôi cấy đĩa thạch, nuôi cấy canh trường, v.v. Theo thành phần của môi trường nuôi cấy, có nhiều loại môi trường nuôi cấy khác nhau được gọi là môi trường tổng hợp, môi trường bán tổng hợp và môi trường tự nhiên. Cấy vi sinh vật được chuẩn bị trong điều kiện vô trùng bên trong một buồng đặc biệt gọi là luồng không khí tầng. Môi trường nuôi cấy và dụng cụ thủy tinh được khử trùng trước khi cấy vi sinh vật mong muốn. Trong điều kiện vô trùng thích hợp, vi sinh vật mục tiêu được chuyển vào môi trường dinh dưỡng đã được khử trùng và ủ ở nhiệt độ tối ưu. Bên trong môi trường, vi sinh vật sẽ phát triển và nhân lên bằng cách sử dụng các chất dinh dưỡng được cung cấp.
Hình 3: Cấy vi khuẩn trên đĩa
Sự khác biệt giữa Gram Stain và Culture là gì?
Gram Stain vs Culture |
|
| ChủngGrams là một kỹ thuật nhuộm phân biệt được sử dụng để phân biệt và xác định vi khuẩn. | Cấy vi sinh là phương pháp nuôi cấy vi sinh vật trong phòng thí nghiệm. |
| Thành phần | |
| Điều này sử dụng các thuốc thử khác nhau bao gồm cả hai vết bẩn. | Điều này sử dụng các môi trường nuôi cấy khác nhau như môi trường rắn, bán rắn và lỏng bao gồm các chất dinh dưỡng và các điều kiện cần thiết khác. |
| Chức năng cơ bản | |
| Điều này cho phép nhóm vi khuẩn thành hai nhóm: gam âm và gam dương. | Điều này cho phép nhân lên các vi sinh vật cho các mục đích khác nhau. |
| Cơ sở | |
| Kết quả nhuộm Gram dựa trên sự khác biệt trong lớp peptidoglycan của thành tế bào. | Vi sinh vật sẽ phát triển và nhân lên bên trong môi trường nuôi cấy. |
| Kết quả | |
| Vi khuẩn gram âm có màu hồng và vi khuẩn gram dương có màu tím. | Trên đĩa, có thể nhìn thấy các khuẩn lạc của vi sinh vật. Trên môi trường lỏng, vi sinh vật ở dạng lơ lửng. |
Tóm tắt - Gram Stain vs Culture
Cấy vi sinh vật được chuẩn bị và duy trì trong các điều kiện phòng thí nghiệm cho các mục đích khác nhau như bảo quản, thử nghiệm, làm sạch hóa chất, v.v … Nhuộm gram là một quy trình nhuộm phân biệt vi khuẩn thành hai nhóm chính gọi là vi khuẩn gram âm và vi khuẩn gram dương. Do đó, sự khác biệt giữa nhuộm gam và nuôi cấy là nhuộm gam là kỹ thuật nhuộm vi khuẩn trong khi nuôi cấy là phương pháp nuôi cấy và duy trì vi sinh vật trong phòng thí nghiệm.
