Sự khác biệt chính giữa GFP và EGFP là GFP là một loại protein hoang dã được kết hợp trong quá trình nhân bản phân tử của các tế bào không phải động vật có vú trong khi EGFP là một loại GFP được cải tiến hoặc thiết kế có thể được sử dụng trên các tế bào động vật có vú.
Nhân bản phân tử là một kỹ thuật tiên tiến được các nhà khoa học sử dụng rất nhiều trong việc biểu hiện protein thông qua công nghệ tái tổ hợp. Trong công nghệ DNA tái tổ hợp, cần phải biến nạp thành công vector tái tổ hợp sang sinh vật chủ. Do đó, trong quá trình biến nạp, cần xác định và xác nhận xem gen quan tâm đã được biến nạp hay chưa đối với vật chủ. Để đánh giá điều này, các nhà sinh học phân tử áp dụng một số kỹ thuật. Trong số các kỹ thuật đó, một là gen phóng viên. Các gen báo cáo này hoạt động như các dấu hiệu có thể chọn lọc để chọn ra các thể biến nạp chính xác. Do đó, Protein huỳnh quang xanh (GFP) và Protein huỳnh quang xanh tăng cường (EGFP) là hai protein báo cáo được sử dụng trong nhân bản phân tử.
GFP là gì?
GFP là một loại protein hoang dã chứa 238 gốc axit amin và một số vùng có thể chọn lọc của trình tự axit amin giúp phân biệt nó với các protein huỳnh quang khác. Hơn nữa, loại protein hoang dã này ban đầu được phân lập từ Aequorea Victoria; một loại sứa. Tuy nhiên, trong các hiện tượng tự nhiên, sứa có thể tạo ra huỳnh quang màu xanh lục để phản ứng với một số kích thích nhất định.
Trước đó, khái niệm này đã gây ngạc nhiên cho các nhà khoa học và họ quyết định sử dụng nó cho công nghệ DNA tái tổ hợp của mình. Do đó, các nhà khoa học đã sử dụng dạng đột biến gen hoang dã này làm gen báo cáo trong các nghiên cứu biểu hiện gen của họ. Gen kiểu hoang dã của GFP có khả năng tạo ra một protein phát huỳnh quang ở nhiệt độ phòng hoặc dưới ánh sáng UV. Do đó, khi được đưa vào các chất biến đổi, nó biểu hiện và tạo ra huỳnh quang. Nếu kết quả huỳnh quang sau quá trình biến đổi, điều đó khẳng định sự thành công của quá trình biến đổi. Nói một cách đơn giản, phát xạ huỳnh quang báo hiệu sự chuyển đổi thành công của vectơ mang gen quan tâm thành vật chủ.
Hình 01: GFP
Vì lý do này, GFP hoạt động như một dấu hiệu biểu hiện gen in vivo. Hiện nay, các kỹ thuật công nghệ gen đang được sử dụng để sản xuất GFP. Ngoài ra, có nhiều phiên bản cải tiến của GFP như EGFP. Do đó, điều này cho phép sử dụng hiệu quả GFP trong các nghiên cứu nhân bản phân tử và biểu hiện gen.
EGFP là gì?
Protein huỳnh quang xanh tăng cường hoặc EGFP là phiên bản cải tiến của GFP. Nói một cách dễ hiểu, chúng ta có thể định nghĩa EGFP là một phiên bản được thiết kế của GFP kiểu hoang dã. Khi gen kiểu hoang dã của GFP đột biến, nó sẽ tạo ra các tác động có lợi. Do đó, gen đột biến của GFP cho phép biểu hiện các ký tự mới và kết quả là chúng tôi có thể tạo ra GFP nâng cao với các đặc điểm được cải thiện. Hơn nữa, chúng tôi có thể đưa các đột biến vào gen GFP kiểu hoang dã một cách thành công bằng cách sử dụng phương pháp chiếu xạ hoặc hóa học. Sau đó, những gen đột biến này tạo ra EGFP, có nhiều đặc điểm có lợi hơn.
Hình 02: EGFP
Các đặc điểm cải tiến của EGFP như sau;
- Có thể phát ra tín hiệu huỳnh quang mạnh hơn.
- Có độ nhạy cao.
- Có thể sử dụng nó trên tế bào động vật có vú thay vì tế bào nhân sơ và sinh vật nhân chuẩn cấp thấp hơn.
- Ngoài ra, tăng độ tinh khiết của sản phẩm.
Vì vậy, so với GFP, EGFP là lựa chọn ưu tiên cho các nghiên cứu biểu hiện gen. Tuy nhiên, sản phẩm đắt hơn so với GFP.
Điểm giống nhau giữa GFP và EGFP là gì?
- GFP và EGFP là hai protein có khả năng phát ra màu xanh lá cây
- Do đó, cả hai đều hoạt động như các protein báo cáo trong các nghiên cứu biểu hiện gen.
- Ngoài ra, có thể tổng hợp cả bằng công nghệ DNA tái tổ hợp.
- Hơn nữa, có thể dễ dàng biến đổi thêm hai loại này để tổng hợp các dạng cải tiến.
Sự khác biệt giữa GFP và EGFP là gì?
Gen phóng viên là gen gắn với gen quan tâm trong công nghệ DNA tái tổ hợp. Nó báo hiệu sự chuyển đổi thành công của vector tái tổ hợp sang vật chủ. Ở đây, GFP và EGFP là hai loại protein hình bông hoa màu xanh lá cây hoạt động như protein phóng viên. Tuy nhiên, điểm khác biệt chính giữa GFP và EGFP là GFP là kiểu hoang dã trong khi EGFP là phiên bản được thiết kế của GFP. Hơn nữa, EGFP có nhiều đặc điểm có lợi hơn GFP. Ví dụ, EGFP tạo ra ánh sáng huỳnh quang mạnh hơn và nhạy hơn GFP. Một sự khác biệt khác giữa GFP và EGFP là hệ thống mà chúng ta có thể sử dụng chúng. Các hệ thống không phải động vật có vú sử dụng GFP trong khi các hệ thống động vật có vú sử dụng EGFP.
Đồ họa thông tin dưới đây trình bày sự khác biệt giữa GFP và EGFP ở dạng bảng.
Tóm tắt - GFP vs EGFP
GFP và EGFP là các protein báo cáo trong các nghiên cứu nhân bản phân tử và biểu hiện gen. GFP là một loại protein hoang dã, là một loại protein phát quang màu xanh lục. Ban đầu, protein được phân lập từ sứa Aequorea victoria. Ngược lại, EFGP là một dạng protein GFP tăng cường. Nó là một loại đột biến thuộc loại hoang dã với các đặc điểm đã được cải thiện. Do đó, EFGP có cường độ tín hiệu cao hơn và độ nhạy cao hơn. Do đó, chúng ta có thể sử dụng nó trên các vector động vật có vú. Ngược lại, việc sử dụng GFP chủ yếu chỉ trên các vector không phải động vật có vú. Nhìn chung, đây là sự khác biệt giữa GFP và EGFP.
