Sự Khác Biệt Chính - Điện Di Gel so với Trang SDS
Điện di trên gel là kỹ thuật tách các đại phân tử trong điện trường. Đây là một phương pháp phổ biến trong sinh học phân tử để tách DNA, RNA và protein khỏi hỗn hợp theo kích thước phân tử của chúng. SDS Page là một loại điện di trên gel được sử dụng để tách protein ra khỏi hỗn hợp protein dựa trên kích thước của chúng. Điện di trên gel là một thuật ngữ dùng để chỉ kỹ thuật thông thường được áp dụng để tách DNA, RNA và protein trong khi SDS Page là một loại điện di gel. Đây là điểm khác biệt chính giữa điện di trên gel và Trang SDS.
Điện di Gel là gì?
Điện di trên gel là một kỹ thuật phổ biến được sử dụng trong các phòng thí nghiệm để tách các phân tử tích điện như DNA, RNA, protein,… ra khỏi hỗn hợp của chúng. Một loại gel được sử dụng trong điện di trên gel. Nó hoạt động như một cái rây phân tử. Có hai loại gel được sử dụng trong điện di trên gel là agarose và polyacrylamide. Lựa chọn gel và chuẩn bị gel là các yếu tố quan trọng cần được xem xét trong điện di gel vì kích thước lỗ của gel cần được thao tác cẩn thận để phân tách tốt các phân tử thông qua điện di trên gel. Điện di trên gel có điện trường nối với hai đầu gel. Một đầu của gel mang điện tích dương trong khi đầu kia mang điện tích âm.
DNA và RNA là những phân tử mang điện tích âm. Một khi chúng được nạp vào gel từ đầu âm của gel và được đặt vào điện trường, chúng sẽ di chuyển qua các lỗ gel về phía đầu tích điện dương của gel. Tốc độ di chuyển phụ thuộc vào điện tích và kích thước của phân tử. Các phân tử nhỏ hơn dễ dàng di chuyển qua các lỗ gel hơn các phân tử lớn hơn. Do đó, các phân tử nhỏ hơn di chuyển một quãng đường dài qua gel và các phân tử lớn hơn di chuyển một quãng đường ngắn. Để quan sát sự di chuyển của các phân tử trên gel, người ta sử dụng các loại thuốc nhuộm đặc biệt. Điện trường được áp dụng trong một khoảng thời gian nhất định và dừng lại để ngăn chặn sự mất mát của các phân tử và giữ cho các phân tử ở vị trí di chuyển của chúng. Có thể quan sát thấy các dải khác nhau trong gel. Các dải này đại diện cho các phân tử có kích thước khác nhau. Do đó, điện di trên gel rất hữu ích để phân biệt các phân tử theo kích thước của chúng.
Điện di trên gel được kết hợp với nhiều kỹ thuật khác nhau như một kỹ thuật chuẩn bị trong sinh học phân tử như PCR, RFLP, nhân bản, giải trình tự DNA, phương pháp thấm phương nam, lập bản đồ bộ gen, v.v.
Hình 01: Điện di gel agarose
Trang SDS là gì?
Điện di trên gel polyacrylamide natri dodecyl sulfat (Trang SDS) là một loại điện di trên gel được sử dụng để tách protein. Khi điện di trên gel được sử dụng để phân tách các protein, cần có các phương pháp điều trị đặc biệt vì các protein không mang điện tích âm như DNA và RNA và không di chuyển về phía đầu dương hoặc đầu âm. Do đó, protein bị biến tính và phủ một lớp điện tích âm trước khi điện di trên gel. Nó được thực hiện bằng cách sử dụng chất tẩy rửa có tên là natri dodecyl sulfat (SDS). Điện di trên gel sử dụng SDS và gel polyacrylamide cho môi trường hỗ trợ được gọi là Trang SDS. Kỹ thuật này thường được sử dụng trong hóa sinh, di truyền học, pháp y và sinh học phân tử.
Trong Trang SDS, các protein được trộn với SDS. SDS mở các protein thành hình dạng tuyến tính và phủ lên chúng một điện tích âm tỷ lệ với khối lượng phân tử của chúng. Do mang điện tích âm, các phân tử protein di chuyển về phía đầu mang điện tích dương của gel và phân tách theo khối lượng phân tử của chúng. Trong Trang SDS, polyacrylamide được sử dụng làm chất hỗ trợ vững chắc cho gel. Sự phân tách thực tế của các protein chủ yếu phụ thuộc vào các đặc tính của gel. Do đó, việc chuẩn bị gel polyacrylamide phải được thực hiện cẩn thận và phải sử dụng đúng nồng độ polyacrylamide. Gel polyacrylamide có độ phân giải cao hơn gel agarose. Do đó, Trang SDS được coi là một kỹ thuật có độ phân giải cao để tách protein.
TrangSDS là một loại điện di gel biến tính. Nó có một hạn chế lớn trong phân tích protein. Vì SDS làm biến tính protein trước khi phân tách, nó không cho phép phát hiện hoạt động của enzym, tương tác liên kết protein, đồng yếu tố protein, v.v.
Hình 02: Trang SDS
Sự khác biệt giữa Điện di Gel và Trang SDS là gì?
Điện di Gel vs Trang SDS |
|
| Điện di trên gel là phương pháp được thực hiện để tách các đại phân tử bằng cách sử dụng điện trường. | SDS Page là kỹ thuật điện di trên gel có độ phân giải cao được sử dụng để tách các protein dựa trên khối lượng của chúng. |
| Chạy Gel | |
| Nó có thể được thực hiện theo cách ngang hoặc dọc. | Trang SDS luôn chạy theo chiều dọc. |
| Cơ sở để tách | |
| Sự phân tách xảy ra tùy theo điện tích và kích thước. | Sự phân tách protein xảy ra theo khối lượng và điện tích. |
| Độ phân giải | |
| Điện di gel agarose có độ phân giải thấp và điện di gel polyacrylamide có độ phân giải cao hơn | Trang SDS có độ phân giải tốt hơn. |
| Biến tính | |
| Điện di trên gel bao gồm cả kỹ thuật biến tính và không biến tính. | SDS Trang làm biến tính protein trước khi phân tách. |
Tóm tắt - Điện di Gel vs Trang SDS
Điện di trên gel là một kỹ thuật phổ biến được sử dụng để tách và phân tích DNA, RNA và protein dựa trên kích thước và điện tích của chúng. Có hai loại điện di gel chính là điện di trên gel agarose và điện di trên gel polyacrylamide. Gel agarose được sử dụng chủ yếu để tách axit nucleic; khi yêu cầu độ phân giải cao hơn, gel polyacrylamide được sử dụng. SDS Page là một loại điện di trên gel thường được sử dụng để tách các hỗn hợp protein phức tạp. Nó được coi là một kỹ thuật tách protein có độ phân giải cao. Đây là sự khác biệt giữa điện di trên gel và Trang SDS.
