Sự khác biệt chính - Nitrocellulose vs Nylon Membrane
Blotting là một kỹ thuật quan trọng để phát hiện các trình tự cụ thể của DNA, RNA và protein từ hỗn hợp của chúng trong sinh học phân tử. Nó được thực hiện bằng cách sử dụng một màng gọi là blot. Có nhiều kỹ thuật thấm khác nhau như thấm phương bắc, phương nam và phương tây. Việc lựa chọn màng thích hợp cho quá trình thấm cần được thực hiện cẩn thận để ngăn chặn sự liên kết không đặc hiệu và phát hiện sai. Nitrocellulose, nylon và PVDF là các màng thường được sử dụng trong kỹ thuật thấm. Chúng có những đặc điểm khác nhau. Sự khác biệt chính giữa nitrocellulose và màng nylon là màng nitrocellulose có tiềm năng cố định protein cao trong khi màng nylon có tiềm năng cố định axit nucleic cao. Tuy nhiên, cả hai loại màng này thường được sử dụng trong kỹ thuật thấm.
Màng Nitrocellulose là gì?
Màng nitrocellulose là màng lọc được sử dụng phổ biến trong kỹ thuật thấm axit nucleic và protein. Nó có tiềm năng liên kết protein cao. Do đó, màng nitrocellulose được sử dụng rộng rãi trong kỹ thuật thấm phương Tây. Màng nitrocellulose tương thích với tất cả các kỹ thuật lai và cho thấy khả năng liên kết vượt trội mà không bị nhiễu. Màng nitrocellulose có bản chất là ưa nước. Chúng tạo ra tương tác ưa nước với các phân tử và cố định chúng trên màng một cách hiệu quả. Màng nitrocellulose thương mại có sẵn với hai kích thước lỗ: 0,45 và 0,2 µm.
Hình 01: Màng nitrocellulose được sử dụng trong thấm nước phương Tây
Màng Nylon là gì?
Màng nylon là một loại màng thương mại khác được sử dụng trong kỹ thuật thấm. Nó được sử dụng thay thế với màng nitrocellulose để thấm phía nam và phía bắc. Màng nylon lý tưởng cho quá trình thấm phương nam hơn nitrocellulose do có ái lực cao với liên kết với DNA. Do một số tính năng độc đáo của màng nylon, các nhà nghiên cứu thường sử dụng màng nylon để thấm phía nam và phía bắc thay vì màng nitrocellulose. Màng nylon cũng được khuyên dùng để loại bỏ và thấm lại, không giống như nitrocellulose.
Hình 02: Màng nylon dùng để thấm phương nam
Sự khác biệt giữa Nitrocellulose và Màng Nylon là gì?
Nitrocellulose vs Màng nylon |
|
Màng nitrocellulose giòn. | Màng nylon ít giòn hơn. |
Xử lý | |
Chúng rất khó xử lý. | Chúng rất dễ xử lý. |
Tái phạm | |
Màng nitrocellulose không được hỗ trợ rất khó đóng lại. | Thay thế dễ dàng với màng nylon. |
Khả năng tương thích với các điều kiện lưu trữ khác nhau | |
Màng nitrocellulose có ít độ bền hơn để chịu được các điều kiện bảo quản khác nhau. | Màng nylon đáp ứng mạnh mẽ hơn với các điều kiện bảo quản khác nhau. |
Sử dụng | |
Bắt buộc phải ủ trước. | Màng nylon không cần ủ sẵn. |
Tính chất ưa nước | |
Màng nitrocellulose có bản chất là ưa nước nhưng ít hút nước hơn màng nylon. | Chúng có bản chất là rất ưa nước. |
Tiềm năng bất động | |
Màng nitrocellulose có ít ái lực hơn với axit nucleic. Nhưng nó có ái lực cao với protein. | Màng nylon có tiềm năng liên kết cao với axit nucleic hơn màng nitrocellulose. |
Tóm tắt - Nitrocellulose vs Nylon Membrane
Nitrocellulose và màng nylon là những tấm đặc biệt được sử dụng trong kỹ thuật thấm để tái tạo mô hình dải trên gel. Chúng cho phép khả năng phát hiện một trình tự cụ thể hoặc một protein từ hỗn hợp bằng cách cố định chúng trên màng. Khi các phân tử đã cố định trên màng, nó có thể được sử dụng làm chất nền để phân tích lai với các đầu dò được đánh dấu. Màng nitrocellulose thường được sử dụng để phát hiện protein trong kỹ thuật thấm phương tây do có ái lực liên kết cao với protein. Màng nylon thường được sử dụng để thấm phía nam và phía bắc. Đây là sự khác biệt giữa nitrocellulose và màng nylon.