Sự khác biệt chính giữa đoạn Klenow và DNA polymerase 1 là đoạn Klenow là một phần lớn của DNA polymerase 1 thiếu hoạt tính exonuclease từ 5 ′ đến 3 ′ trong khi DNA polymerase là một enzyme của E. coli có cả ba miền bao gồm hoạt động exonuclease từ 5 ′ đến 3 ′.
DNA polymerase là một trong những enzyme quan trọng tham gia vào quá trình sao chép DNA trong cơ thể sống. Có nhiều dạng khác nhau của enzyme DNA polymerase được tìm thấy ở sinh vật nhân thực và sinh vật nhân sơ dựa trên kích thước và hình dạng. DNA polymerase 1, 2 và 3 chỉ được tìm thấy trong các sinh vật nhân sơ, và chúng đóng các vai trò khác nhau trong quá trình sao chép DNA. DNA polymerase 1 có ba miền với 5 ′ đến 3 ′ polymerase, 3 ′ đến 5 ′ exonuclease hoạt động và 5 ′ đến 3 ′ exonuclease hoạt động. Đoạn Klenow là sản phẩm phân giải protein của DNA polymerase 1. Nó sở hữu 5 đến 3 ′ polymerase và 3 ′ đến 5 ′ exonuclease của DNA polymerase 1 nguyên vẹn, nhưng nó thiếu hoạt động exonuclease từ 5 ′ đến 3 ′.
Klenow Fragment là gì?
Đoạn Klenow là một phần lớn của DNA polymerase 1. Không giống như DNA polymerase 1, hoạt động exonuclease từ 5 ′ đến 3 ′ không được nhìn thấy trong đoạn Klenow vì nó thiếu miền exonuclease từ 5 ′ đến 3 ′. Các đoạn Klenow được tạo ra bằng cách tiêu hóa DNA polymerase 1 với một protease gọi là subtilisin, là một enzyme tiêu hóa protein. Trong một số ứng dụng, hoạt tính exonuclease từ 3 ′ đến 5 ′ của đoạn Klenow trở nên không mong muốn. Nó có thể được loại bỏ bằng cách đưa vào một đột biến trong gen mã hóa đoạn Klenow. Enzyme tạo thành chỉ có hoạt tính polymerase từ 5 'đến 3' được gọi là đoạn exo-Klenow. Về mặt hình thái, mảnh Klenow giống với bàn tay phải của con người. Nó có miền exonuclease 3'-5 ′ đầu N và miền polymerase ở đầu C cách nhau khoảng 30 A.
Hình 01: Đoạn Klenow và DNA Polymerase 1
MảnhKlenow là một công cụ quan trọng trong kỹ thuật sinh học phân tử. Các đoạn Klenow có nhiều mục đích sử dụng. Chúng cực kỳ quan trọng trong việc nhân bản đầu cùn để tạo ra các đoạn cùn. Các mảnh Klenow có thể loại bỏ phần nhô ra 3 ′ hoặc lấp đầy phần nhô ra 5 ′ để tạo thành đầu cùn. Hơn nữa, các đoạn Klenow được sử dụng để tổng hợp DNA sợi kép từ các sợi đơn. Hơn nữa, chúng được sử dụng để chuẩn bị các đầu dò được đánh dấu phóng xạ bằng cách sử dụng hoạt tính DNA polymerase phụ thuộc DNA 5’ đến 3 ′.
DNA Polymerase 1 là gì?
DNA polymerase 1 (Pol 1) là một loại enzyme được tìm thấy trong sinh vật nhân sơ, cần thiết cho quá trình sao chép DNA của vi khuẩn. Đây là loại DNA polymerase đầu tiên được Arthur Kornberg phát hiện vào năm 1956. Pol 1 là polymerase phong phú nhất ở E. coli. Nó được mã hóa bởi gen polA và bao gồm 928 axit amin. Nó bao gồm ba miền. Cả ba miền đều thực hiện các chức năng riêng biệt. Hai miền thực hiện hoạt động exonuclease từ 5 ′ đến 3 ′ và hoạt động exonuclease từ 3 ′ đến 5 ′. Do hoạt động này được sở hữu bởi Pol 1, nó phổ biến như một loại enzyme sửa chữa DNA hơn là một loại enzyme sao chép DNA. Miền thứ ba có khả năng xúc tác nhiều lần polyme hóa (5 ′ đến 3 ′) trước khi giải phóng DNA khuôn mẫu và kết nối các đoạn Okazaki với nhau bằng cách lấp đầy DNA mới và loại bỏ các đoạn mồi RNA.
Hình 02: DNA Polymerase
Pol 1 được phân lập từ E Coli được sử dụng rộng rãi trong các ứng dụng phân tử. Tuy nhiên, khi Taq Polymerase được phát hiện, nó đã thay thế E Coli Pol 1 trong công nghệ PCR. Taq polymerase là một loại DNA polymerase có thể điều chỉnh nhiệt thuộc Pol 1.
Điểm giống nhau giữa Klenow Fragment và DNA Polymerase 1 là gì?
- Đoạn Klenow là một phần lớn của DNA polymerase 1.
- Chúng có hoạt tính DNA polymerase phụ thuộc DNA từ 5 đến 3 ′ và hoạt động exonuclease 3’ đến 5 ′ làm trung gian cho quá trình đọc hiệu đính.
- Chúng được sử dụng cho nhiều mục đích.
Sự khác biệt giữa Klenow Fragment và DNA Polymerase 1 là gì?
Sự khác biệt chính giữa đoạn Klenow và DNA polymerase 1 là đoạn Klenow thiếu hoạt tính exonuclease từ 5 ′ đến 3 ′ trong khi DNA polymerase 1 có hoạt tính exonuclease từ 5 ′ đến 3 ′. Do đó, đoạn Klenow có hai miền, trong khi DNA polymerase 1 có cả ba miền.
Đồ họa thông tin dưới đây hiển thị chi tiết hơn về sự khác biệt giữa đoạn Klenow và DNA polymerase 1.
Tóm tắt - Klenow Fragment vs DNA Polymerase 1
DNA polymerase 1 là một enzym của E. coli có ba miền là miền trùng hợp 5 ′ đến 3 ′, miền exonuclease từ 3 ′ đến 5 ′ và miền exonuclease từ 5 ′ đến 3 ′. Đoạn Klenow là một phần lớn của DNA polymerase. Nó thiếu một miền của DNA polymerase 1, đó là miền exonuclease từ 5 ′ đến 3 ′. Sự khác biệt chính giữa đoạn Klenow và DNA polymerase 1 là các đoạn Klenow không có miền exonuclease từ 5 ′ đến 3 ′ trong khi DNA polymerase 1 có miền exonuclease từ 5 ′ đến 3 ′.
