Sự khác biệt chính giữa chiết xuất DNA thực vật và động vật là trong chiết xuất DNA thực vật, cần phải phá vỡ thành tế bào bằng cách nghiền mô trong nước đá khô hoặc nitơ lỏng để giải phóng các chất trong tế bào trong khi chiết xuất DNA động vật., không cần thiết phải thực hiện bước này vì tế bào động vật không có thành tế bào.
DNA bộ gen là vật chất di truyền của tế bào động thực vật. DNA bộ gen là duy nhất đối với từng loài thực vật hoặc động vật. Việc tách chiết DNA của DNA chất lượng tốt là điều kiện tiên quyết để nghiên cứu phân tử. DNA của các sinh vật được chiết xuất để xác định, chẩn đoán bệnh, phát hiện các gen và trình tự cụ thể, mục đích pháp y, xét nghiệm quan hệ cha con, giải trình tự bộ gen và phát triển thuốc, v.v. Phương pháp tách chiết DNA khác nhau tùy thuộc vào loại tế bào - cho dù đó là tế bào động vật hay tế bào thực vật.
Tách chiết DNA thực vật là gì?
DNA trong tế bào thực vật được chiết xuất cho các nghiên cứu phân tử khác nhau. Nó được yêu cầu để chiết xuất DNA bộ gen nguyên vẹn, tinh khiết. Do đó, có nhiều loại quy trình tách chiết DNA khác với quy trình tách chiết DNA từ tế bào động vật. Điều này là do tế bào thực vật có thành tế bào nên bị phá vỡ để lấy các chất trong tế bào ra ngoài.
Chiết xuất thường được thực hiện bằng cách nghiền các mô thực vật trong đá khô hoặc nitơ lỏng bằng cối và chày. Sau đó, màng tế bào bị phá vỡ và nội dung tế bào được đưa ra ngoài vào một bộ đệm chiết xuất. Điều này thường được thực hiện bằng cách sử dụng chất tẩy rửa; Dung dịch đệm SDS (natri dodecyl sulfat) hoặc CTAB (cetyltrimethylammonium bromide). DNA được giải phóng được bảo vệ khỏi các nuclease nội sinh bằng cách sử dụng tác nhân chelat như EDTA. Hơn nữa, protein được tách khỏi DNA bằng cách sử dụng chloroform hoặc phenol.
Hình 01: Tách chiết DNA thực vật
Thực vật tổng hợp polysaccharid và polyphenol, bao gồm flavonoid và các chất chuyển hóa thứ cấp khác. Các hợp chất này can thiệp vào việc tách chiết DNA bộ gen tinh khiết. Do đó, hầu hết các quy trình chiết xuất DNA thực vật đều bao gồm một bước khác, chẳng hạn như kỹ thuật gradient mật độ cesium clorua để loại bỏ các hợp chất này.
Hầu hết các quy trình tách chiết DNA đều khuyến nghị sử dụng các mẫu lá tươi để tách chiết DNA. Một số phương pháp không bao gồm các hóa chất nguy hiểm như nitơ lỏng và phenol. Quy trình CTAB (Cetyl trimethylammonium bromide) là một quy trình tách chiết DNA thực vật phổ biến, tạo điều kiện thuận lợi cho việc tách chiết DNA bộ gen thực vật chất lượng cao. Đây là một phương pháp đơn giản, an toàn, đáng tin cậy và tiết kiệm chi phí để tách chiết DNA thực vật. Hầu hết các phương pháp khác là phiên bản sửa đổi của phương pháp CTAB.
Tách chiết DNA động vật là gì?
Tách chiết DNA động vật là tách chiết DNA bộ gen từ tế bào động vật để phân tích phân tử. Không giống như chiết xuất DNA thực vật, việc phá vỡ thành tế bào là không cần thiết đối với tế bào động vật vì chúng không có thành tế bào. Tế bào máu là loại tế bào động vật phổ biến nhất được sử dụng cho nhiều mục đích khác nhau.
Hình 02: Tách chiết DNA
Phương pháp phenol-chloroform là một trong những lựa chọn tốt nhất cho tế bào máu. Năng suất và chất lượng DNA cao khi tách chiết DNA từ phương pháp này. Đây là một phương pháp tách chiết DNA lỏng-lỏng, và phương pháp này tách các phân tử DNA trên cơ sở khả năng hòa tan của chúng trong các dung dịch không thể trộn lẫn. Phenol, chloroform và isoamyl alcohol là ba thành phần hàng đầu của phương pháp này.
Sự giống nhau giữa tách chiết DNA thực vật và động vật là gì?
- Trong quá trình tách chiết DNA động vật và thực vật, màng tế bào phải bị phá vỡ.
- DNA cần được bảo vệ khỏi các nuclease nội sinh.
- Hơn nữa, việc cắt đứt DNA cần được ngăn chặn.
- Bộ dụng cụ thương mại có sẵn để tách chiết DNA thực vật và DNA động vật.
- Hầu hết các phương pháp tách chiết DNA thực vật và động vật đều cần sửa đổi và tiêu chuẩn hóa liên tục.
Sự khác biệt giữa tách chiết DNA thực vật và động vật là gì?
Sự khác biệt chính giữa chiết xuất DNA thực vật và động vật là chiết xuất DNA thực vật yêu cầu nghiền mô thực vật trong đá khô hoặc nitơ lỏng để phá vỡ thành tế bào trong khi chiết xuất DNA động vật không yêu cầu bước này vì chúng động vật. tế bào không có vách tế bào. Phương pháp CTAB là một trong những phương pháp tốt nhất để tách chiết DNA thực vật trong khi phương pháp phenol-chloroform là một trong những phương pháp tốt nhất để tách chiết DNA động vật.
Bảng đồ họa thông tin dưới đây trình bày sự khác biệt giữa chiết xuất DNA thực vật và động vật.
Tóm tắt - Tách chiết DNA Thực vật và Động vật
Có các phương pháp khác nhau để tách chiết DNA từ các loại tế bào khác nhau. Do đó, các quy trình tách chiết DNA thực vật khác với các quy trình tách chiết DNA tế bào động vật. Tách chiết DNA thực vật đòi hỏi sự phá vỡ thành tế bào, màng tế bào và màng nhân trong khi tách chiết DNA động vật đòi hỏi sự phá vỡ màng tế bào và màng nhân. Quan trọng hơn, chiết xuất DNA của tế bào động vật không yêu cầu phá vỡ thành tế bào bằng cách nghiền trong đá khô hoặc nitơ lỏng. Do đó, đây là điểm khác biệt chính giữa chiết xuất DNA thực vật và động vật.