Sự khác biệt chính giữa nấm men một lai và nấm men hai lai là nấm men một lai là một xét nghiệm dựa trên in vitro để phân tích tương tác DNA-protein trong khi nấm men hai lai là một xét nghiệm dựa trên in vitro để phân tích tương tác protein-protein.
Nghiên cứu sự tương tác giữa các phân tử tế bào có thể giúp xác định các vị trí nhận biết liên quan đến biểu hiện gen và con đường protein. Tương tác giữa DNA và protein là không thể thiếu đối với các quá trình tế bào như sửa đổi DNA và điều hòa phiên mã, v.v. Mặt khác, tương tác protein và protein đóng vai trò quan trọng trong các quá trình tế bào như sao chép, phiên mã, dịch mã và truyền tín hiệu. Do đó, điều cực kỳ quan trọng là xác định những tương tác này của các phân tử tế bào thông qua các xét nghiệm khác nhau. Men một lai và men lai hai là hai thử nghiệm dựa trên in vitro để phân tích tương tác giữa DNA-protein và protein-protein.
Yeast One Hybrid là gì?
Men một lai (Y1H) là một xét nghiệm dựa trên in vitro để phân tích các tương tác DNA-protein nội bào. Phương pháp này được Wang và Reed thiết lập lần đầu tiên vào năm 1993. Kể từ đó, nó đã cho thấy một sức mạnh lớn hơn trong nghiên cứu sinh học. Trong xét nghiệm này, có hai thành phần chính: mồi DNA và mồi protein.
Hình 01: Men One Hybrid
Trong quy trình này, một chuỗi DNA (DNA mồi) lần đầu tiên được nhân bản ngược dòng từ hai phóng viên khác nhau (HIS3, LacZ). Các cấu trúc báo cáo này được tích hợp vào bộ gen của một chủng nấm men. Các yếu tố phiên mã được lấy làm mồi protein. Các yếu tố phiên mã được dung hợp với vùng kích hoạt phiên mã (AD) của yếu tố phiên mã Gal4 của nấm men để tạo ra các protein lai. Toàn bộ protein lai này được tích hợp vào một plasmid trước khi đưa nó vào chủng nấm men. Sau khi đưa vào plasmid tái tổ hợp, khi yếu tố phiên mã tương tác với đoạn DNA, đoạn AD sẽ kích hoạt biểu hiện gen báo cáo (HIS3 hoặc LacZ). Giải trình tự các plasmid cho phép xác định yếu tố phiên mã có thể liên kết với đoạn DNA. Gần đây, phương pháp lai men một được sử dụng để nghiên cứu chẩn đoán bệnh. Do đó, trong tương lai, xét nghiệm này sẽ được sử dụng rộng rãi hơn trong nghiên cứu khoa học và điều trị y tế.
Men Hai Lai là gì?
Lai hai men (Y2H) là một xét nghiệm dựa trên in vitro để phân tích sự tương tác giữa protein và protein nội bào. Phương pháp này ban đầu được tìm ra bởi Stanley Fields và Ok-Kyu Song vào năm 1989. Kỹ thuật này phát hiện tương tác protein-protein bằng cách sử dụng yếu tố phiên mã Gal4 của nấm men.
Hình 02: Men Hai Lai
Trong phương pháp này, hai hợp nhất (lai) lần đầu tiên được xây dựng bằng cách sử dụng các protein quan tâm: hợp nhất một protein với vùng liên kết DNA (DBD) và bằng cách kết hợp protein kia với vùng hoạt hóa (AD) của yếu tố phiên mã Gal4. Protein hợp nhất với DBD được gọi là mồi trong khi protein kết hợp với AD được gọi là mồi. Trong chủng nấm men, khi tương tác giữa mồi và con mồi, DBD và AD được đưa đến gần nhau để tạo ra yếu tố phiên mã Gal4 có chức năng ngược dòng gen báo cáo. Yếu tố phiên mã chức năng kích hoạt biểu hiện gen báo cáo. Hơn nữa, phương pháp này hiện đang được sử dụng để sàng lọc sự tương tác của các protein màng tích hợp trong tế bào động vật có vú.
Điểm giống nhau giữa nấm men một loại lai và nấm men hai loại lai?
- Men một lai và men lai hai là hai thử nghiệm dựa trên in vitro để phân tích tương tác giữa DNA-protein và protein-protein.
- Những xét nghiệm này sử dụng các chủng nấm men.
- Cả hai xét nghiệm đều sử dụng miền kích hoạt (AD) của yếu tố phiên mã Gal4.
- Họ sử dụng biểu hiện gen phóng viên (HIS3, hoặc LacZ) để phát hiện các tương tác.
- Họ có mồi và con mồi.
- Cả hai thử nghiệm đều rất hữu ích trong nghiên cứu sinh học hiện đại.
Sự khác biệt giữa men một giống và men hai lai là gì?
Men một lai là một xét nghiệm dựa trên in vitro để phân tích sự tương tác giữa DNA và protein trong khi men lai hai là một xét nghiệm dựa trên trong ống nghiệm để phân tích sự tương tác giữa protein và protein. Vì vậy, đây là sự khác biệt chính giữa nấm men một lai và nấm men hai lai. Hơn nữa, ở nấm men một phép lai, mồi là một đoạn DNA và con mồi là một phân tử protein. Mặt khác, ở nấm men lai hai, cả mồi và con mồi đều là các phân tử protein.
Infographic dưới đây liệt kê sự khác biệt giữa men một lai và men hai lai dưới dạng bảng để so sánh song song.
Tóm tắt - Men Một Lai vs Men Hai Lai
Men một lai và men hai lai là hai thử nghiệm quan trọng dựa trên cơ sở trong ống nghiệm. Men một lai là một thử nghiệm dựa trên in vitro để phân tích tương tác DNA và protein trong khi men hai lai là một thử nghiệm dựa trên in vitro để phân tích tương tác protein và protein. Vì vậy, đây là sự khác biệt chính giữa nấm men một lai và nấm men hai lai.
