Sự khác biệt chính - Đo lưu lượng tế bào so với FACS
Theo lý thuyết tế bào, tế bào là đơn vị cấu trúc và chức năng cơ bản của tất cả các cơ thể sống. Phân loại tế bào là một phương pháp được sử dụng để tách các tế bào khác nhau theo các đặc điểm sinh lý và hình thái. Chúng có thể có đặc điểm nội bào hoặc ngoại bào. Tương tác của DNA, RNA và protein được coi là đặc tính tương tác nội bào trong khi hình dạng, kích thước và các protein bề mặt khác nhau được coi là đặc tính ngoại bào. Trong khoa học hiện đại, các phương pháp phân loại tế bào đã dẫn đến việc hỗ trợ các nghiên cứu khác nhau trong nghiên cứu sinh học và cũng như thiết lập các nguyên tắc mới thông qua nghiên cứu về y học. Việc phân loại tế bào được tiến hành trên nhiều phương pháp khác nhau, bao gồm cả phương pháp thô sơ với ít thiết bị hơn và phương pháp công nghệ tiên tiến với việc sử dụng máy móc tinh vi. Đo dòng tế bào, phân loại tế bào hoạt hóa huỳnh quang (FACS), lựa chọn tế bào từ tính và phân loại tế bào đơn lẻ là những phương pháp chính được sử dụng. Phương pháp đo tế bào dòng chảy và FACS được phát triển để phân biệt các tế bào theo các đặc tính quang học của chúng. FACS là một loại phương pháp đo tế bào dòng chảy chuyên dụng. Phương pháp đo tế bào dòng chảy là một phương pháp được sử dụng trong quá trình phân tích một quần thể tế bào không đồng nhất theo các phân tử, kích thước và thể tích bề mặt tế bào khác nhau, cho phép điều tra các tế bào đơn lẻ. FACS là một quá trình trong đó hỗn hợp mẫu của các tế bào được sắp xếp theo đặc điểm tán xạ ánh sáng và huỳnh quang của chúng vào hai hoặc nhiều thùng chứa. Đây là điểm khác biệt chính giữa phương pháp đo tế bào dòng chảy và FACS.
Flow Cytometry là gì?
Đo lường tế bào dòng chảy là một phương pháp được sử dụng để kiểm tra và xác định sự biểu hiện của các phân tử nội bào và bề mặt tế bào, đồng thời xác định và xác định đặc điểm của các loại tế bào riêng biệt. Nó cũng được sử dụng để xác định khối lượng tế bào và kích thước tế bào và để đánh giá độ tinh khiết của các quần thể con được phân lập. Điều này cho phép đánh giá đa tham số của các ô đơn lẻ tại cùng một thời điểm. Phương pháp đo tế bào dòng chảy được sử dụng để đo cường độ huỳnh quang được tạo ra do các kháng thể được đánh dấu huỳnh quang giúp xác định các protein hoặc phối tử liên kết với các tế bào liên kết.
Hình 01: Phép đo lưu lượng tế bào
Nói chung, đo tế bào dòng chảy chủ yếu bao gồm ba hệ thống phụ. Chúng là chất lỏng, điện tử và quang học. Trong phép đo tế bào dòng chảy, năm thành phần chính có sẵn được sử dụng để phân loại tế bào. Chúng là, một tế bào dòng chảy (một dòng chất lỏng được sử dụng để vận chuyển chúng và sắp xếp các tế bào cho quá trình cảm biến quang học), một hệ thống đo lường (có thể là các hệ thống khác nhau bao gồm, đèn thủy ngân và đèn xenon, làm mát bằng nước công suất cao hoặc công suất thấp laser làm mát bằng không khí hoặc laser diode), một bộ ADC; Hệ thống chuyển đổi tương tự sang kỹ thuật số, hệ thống khuếch đại và một máy tính để phân tích. Quá trình thu thập là quá trình thu thập dữ liệu từ các mẫu bằng máy đo lưu lượng tế bào. Quá trình này được thực hiện bởi một máy tính được kết nối với máy đo lưu lượng tế bào. Phần mềm có trong máy tính phân tích thông tin được cung cấp cho máy tính từ máy đo lưu lượng tế bào. Phần mềm cũng có khả năng điều chỉnh các thông số của thí nghiệm điều khiển máy đo lưu lượng.
FACS là gì?
Trong bối cảnh của phương pháp đo tế bào dòng chảy, phân loại tế bào kích hoạt huỳnh quang (FACS) là một phương pháp được sử dụng để phân biệt và phân loại một mẫu hỗn hợp các tế bào sinh học. Các ô được phân tách từ hai hoặc nhiều vùng chứa. Phương pháp phân loại dựa trên các đặc điểm vật lý của tế bào bao gồm đặc điểm tán xạ ánh sáng và huỳnh quang của tế bào. Đây là một kỹ thuật khoa học quan trọng, có thể được sử dụng để thu được các kết quả định lượng và định tính đáng tin cậy của các tín hiệu huỳnh quang được phát ra từ mỗi tế bào. Trong FACS, ban đầu, hỗn hợp tế bào thu được trước; một huyền phù được dẫn đến tâm của một dòng chất lỏng hẹp đang chảy nhanh. Dòng chảy của chất lỏng được thiết kế để phân tách các tế bào trong huyền phù dựa trên đường kính của mỗi tế bào. Một cơ chế rung được áp dụng cho dòng huyền phù dẫn đến hình thành các giọt riêng lẻ.
Hình 02: FACS
Hệ thống được hiệu chỉnh để tạo ra một giọt duy nhất với một ô. Ngay trước khi hình thành các giọt, huyền phù dòng di chuyển dọc theo thiết bị đo huỳnh quang để phát hiện đặc tính huỳnh quang của mỗi tế bào. Tại điểm hình thành các giọt, một vòng sạc điện được đặt để tạo ra một điện tích cho vòng trước khi đo cường độ huỳnh quang. Khi các giọt được hình thành từ dòng huyền phù, một điện tích bị giữ lại trong các giọt, sau đó đi vào hệ thống làm lệch tĩnh điện. Theo điện tích, hệ thống chuyển các giọt thành các thùng chứa khác nhau. Phương pháp áp dụng phí thay đổi tùy theo các hệ thống khác nhau được sử dụng trong FACS. Thiết bị được sử dụng trong FACS được gọi là thiết bị phân loại tế bào hoạt hóa huỳnh quang.
Sự giống nhau giữa Flow Cytometry và FACS là gì?
Phương pháp đo tế bào dòng chảy và FACS được phát triển để phân biệt các tế bào theo đặc tính quang học của chúng
Sự khác biệt giữa Flow Cytometry và FACS là gì?
Flow Cytometry vs FACS |
|
| Lưu lượng tế bào là một phương pháp được sử dụng trong quá trình phân tích một quần thể tế bào không đồng nhất theo các phân tử bề mặt tế bào khác nhau, kích thước và khối lượng cho phép điều tra các tế bào đơn lẻ. | FACS là một quy trình trong đó hỗn hợp mẫu của các tế bào được sắp xếp theo đặc điểm tán xạ ánh sáng và huỳnh quang của chúng vào hai hoặc nhiều thùng chứa. |
Tóm tắt - Lưu lượng tế bào so với FACS
Tế bào là đơn vị cấu trúc và chức năng cơ bản của tất cả các cơ thể sống. Phân loại tế bào là quá trình các tế bào được phân lập và biệt hóa thành các loại khác nhau dựa trên các đặc tính nội bào và ngoại bào của chúng. Phương pháp đo lưu lượng tế bào và FACS là hai phương pháp quan trọng trong phân loại tế bào. Cả hai quá trình đều được phát triển để phân biệt tế bào theo các đặc tính quang học của chúng. Phương pháp đo tế bào dòng chảy là một phương pháp được sử dụng trong quá trình phân tích một quần thể tế bào không đồng nhất theo các phân tử, kích thước và thể tích bề mặt tế bào khác nhau, cho phép điều tra các tế bào đơn lẻ. FACS là một quá trình trong đó hỗn hợp mẫu của các tế bào được sắp xếp theo đặc điểm tán xạ ánh sáng và huỳnh quang của chúng vào hai hoặc nhiều thùng chứa. Đây là sự khác biệt giữa Flow Cytometry và FACS.
Tải xuống phiên bản PDF của Flow Cytometry vs FACS
Bạn có thể tải xuống phiên bản PDF của bài viết này và sử dụng nó cho mục đích ngoại tuyến theo ghi chú trích dẫn. Vui lòng tải xuống phiên bản PDF tại đây Sự khác biệt giữa Flow Cytometry và FACS
